MURC est un partenaire d’interaction de STIM1 impliqué dans la signalisation calcique

• Main Author: Frappier, Maude
• Other Authors: Boulay, Guylain
• Language: French
• Published: Université de Sherbrooke 2015
• Subjects: STIM1; MURC; Ca2+; Signalisation calcique
• Online Access: http://hdl.handle.net/11143/8332

Dans les cardiomyocytes, la concentration intracellulaire de Ca2+ doit être finement régulée pour maintenir l’homéostasie calcique. La protéine Stromal interaction molecule 1 (STIM1), qui joue un rôle important dans le maintien des niveaux intracellulaires de Ca2+ des cellules non excitables en opérant l’entrée capacitative de Ca2+ (SOCE), est aussi présente dans les cardiomyocytes. Plusieurs études démontrent que STIM1 et le SOCE jouent un rôle important dans le développement de l’hypertrophie des cardiomyocytes. De plus, récemment, un nouveau rôle de STIM1 a commencé à émerger. STIM1 pourrait moduler l’expression de certains canaux calciques à la membrane plasmique en régulant leur trafic intracellulaire. Le but de l’étude était d’identifier des partenaires d’interaction de STIM1 dans l’optique de révéler le mécanisme par lequel STIM1 induit l’internalisation d’un canal calcique voltage-dépendant. Les protéines recueillies par le pull-down à partir des lysats de coeurs de rats avec une colonne d’affinité composée du domaine ERM de STIM1, ont été analysées en spectrométrie de masse. La protéine Muscle related coiled-coil (MURC), une protéine de la famille des Cavin, a été retenue comme partenaire d’interaction potentiel de STIM1. Comme elle est exprimée dans les cardiomyocytes et dans les cellules musculaires squelettiques, qui sont des cellules où la régulation de la signalisation calcique est primordiale pour le bon fonctionnement des tissus et qu’elle semble interagir avec STIM1, qui est un acteur important de la signalisation calcique, notre objectif s’est élargi et nous avons investigué sur l’implication de MURC dans la signalisation calcique en général. Nous avons donc confirmé par co-immunoprécipitation que le domaine ERM de STIM1 interagissait avec MURC. Puis, par des essais d’imagerie calcique, nous avons démontré que la surexpression de MURC pouvait provoquer différentes réponses dans différents types cellulaires en fonction de l’activation de la mobilisation calcique. En effet, nous avons observé une augmentation du SOCE qui est indépendante de la voie RhoA/ROCK dans les cellules HEK293T, une diminution de l’entrée de calcium médiée par un récepteur (ROCE) qui est pourrait être dépendante de la voie RhoA/ROCK dans les cellules T6.11 et une diminution de l’activation de RhoA de façon dépendante de l’activation du SOCE dans les cardiomyocytes HL-1. Nous avons aussi montré que MURC pouvait interagir à la membrane plasmique avec les protéines Orai1, qui sont les protéines formant les canaux CRAC (Ca2+ release-activated Ca2+) du SOCE et ce de façon dépendante de l’activation de STIM1. Enfin, les résultats de cette étude suggèrent que MURC est un partenaire d’interaction de STIM1 impliqué dans la signalisation calcique. En effet, MURC peut moduler l’activation de RhoA, ce qui pourrait induire l’internalisation de canaux calciques. De plus, son interaction avec STIM1 et Orai1 pourrait notamment faire un pont facilitant l’interaction entre STIM1 et Orai1 ce qui aurait pour effet d’augmenter le SOCE et possiblement contribuer à augmenter l’hypertrophie des cardiomyocytes.