| Summary: | Le but de ce travail a été d’étudier l’effet de la stimulation ß-adrénergique (ßADR) (en utilisant l’isoprotérenol (ISO), l’agoniste ß-adrénergique) sur l’entrée de Ca dans le myoplasme du muscle squelettique à contraction rapide de grenouille suite à des stimulations électriques.
Dans ce travail, en nous servant de la méthode d’EGTA/rouge de phénol (Pape et al., 1995) associée aux techniques de courant imposé et de voltage imposé, nous avons étudié l’effet de la stimulation ßADR en mesurant les paramètres intracellulaires pouvant affecter l’entrée de Ca dans le myoplasme tels le pH intracellulaire, le contenu total en Ca du réticulum sarcoplasmique, la vitesse de l’entrée de Ca dans le myoplasme, la quantité de Ca extracellulaire entré dans le myoplasme et le mouvement de charge intra membranaire suite à des stimulations électriques. Nous avons observé une augmentation de l’entrée de Ca dans le myoplasme sous l'effet d'ISO (chez les fibres exposées à 10 μM d’ISO pendant 8 minutes) et ce, en réponse à des potentiels d’actions obtenus à l'aide de la technique de courant imposé. Comme cet effet a été en relation directe avec le Ca extracellulaire, nous avons utilisé d'autres stratégies pour élucider davantage l'effet ß-adrénergique sur une possible augmentation importante de l’entrée de Ca extracellulaire dans le myoplasme.
En premier lieu, les expériences en courant imposé avec les fibres vidangées de leur Ca sarcoplasmique ont permis de mesurer la quantité excédentaire de Ca extracellulaire entré dans le myoplasme suite à des stimulations électriques chez les fibres exposées à ISO (10 μM, 8 minutes). Toutefois, la quantité mesurée de Ca d'origine extracellulaire entré dans le myoplasme ne correspond pas à la totalité de l'augmentation de l'entrée de Ca dans le myoplasme en réponse à un train de potentiels d’action (PA) mesurée dans nos expériences en courant imposé.
En deuxième lieu, les expériences avec la technique de voltage imposé n’ont pas démontré qu’ISO augmente de manière significative le pic d’amplitude de courant entrant de Ca tel que proposé par Arreola et al. (J. Physiol (Lond) 1987; 393:307-330). Cependant, ISO a diminué le temps au mi pic du courant entrant de Ca indiquant ainsi que l’activation du courant entrant calcique se fait plus rapidement sous l’effet d’ISO. En nous servant des protocoles de pulses de dépolarisation multiples pour mimer une stimulation tétanique dans des conditions plus physiologiques telles qu’utilisées dans la technique de courant imposé, et en présence de 50 mM de sodium extracellulaire, nous n’avons pas obtenu une entrée plus importante de Ca extracellulaire dans le myoplasme sous l’effet d’ISO.
Les études sur la vitesse de libération de Ca dans le myoplasme ont indiqué une augmentation de ce paramètre par ISO. D’autre part, nos résultats indiquent aussi que l’effet d'ISO ne passe pas par une modification des propriétés d’activation des récepteurs à la dihydropyridine puisqu’aucune variation du mouvement de charges intra- membranaire n’a été observée. Ces résultats (dans les conditions où on considère que l’augmentation de l’entrée Ca dans le myoplasme aurait lieu pendant les stimulations électriques de la fibre exposée pendant 8 minutes avec 10 μM d’ISO), suggèrent que les propriétés de l’activation des canaux de libération de Ca du réticulum sarcoplasmique
sont affectés sous l’effet d’ISO.
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