Summary: | ZPK est une serine/thréonine kinase qui semble démontrer une implication dans la régulation de la croissance et la différenciation cellulaire. Des études d'expression employant des vecteurs arborant l'ADNc de ZPK ont été réalisées chez les NIH 3T3, afin de déterminer si cette protéine kinase avait réellement une action potentielle sur le contrôle de la croissance cellulaire. Deux systèmes différents qui permettent la surexpression ont été utilisés : un premier amenant une expression constitutive, et un second réalisant une expression inductible par un glucocorticoïde. L'expression stable de ZPK, exercée de façon constitutive, mène à une réduction dramatique de la capacité de croissance des cellules. Cette diminution a été mesurée par un essai de formation de colonies en culture monocouche. Par opposition, la surexpression de l'ADNc de ZPK contenant une mutation du site de fixation de l'ATP, n'affecte en rien l'expansion des cellules transfectées. L'utilisation d'un vecteur inductible a permis de contrôler l'expression de ZPK et ainsi démontrer par des études de croissance et de mesure de synthèse d'ADN, que ZPK avait réellement un effet négatif sur la croissance des NIH 3T3. L'utilisation d'une construction contenant le déterminant antigénique HA couple a ZPK a permis de démontrer par Western blot et immunohistochimie, l'expression in vivo de la protéine réalisée à partir de l'ADNc. Ces résultats suggèrent que la protéine ZPK peut agir comme régulateur de la croissance cellulaire et que cette fonction serait médiée en partie par l'activité kinase intrinsèque à la protéine.
|