| Summary: | L'activité du récepteur AT[indice inférieur 1] de l'angiotensine II (Ang II) peut être régulée soit par des interactions protéine-protéine, soit par des modifications post-traductionnelles. La présence d'un motif de liaison à la cavéoline ([indice supérieur 302]Tyr-X-[indice supérieur 304]Phe-XXXX-[indice supérieur 309]Phe-XX-[indice supérieur 312]Tyr) dans la queue cytoplasmique du récepteur AT[indice inférieur 1] suggère un rôle des cavéoles dans la fonction de ce récepteur. Afin d'étudier le rôle de ce motif, nous avons construit un mutant (AT[indice inférieur 1]-YFFY/A) où les résidus aromatiques de ce motif furent remplacés par des alanines. Le récepteur AT[indice inférieur 1]-YFFY/A est moins exprimé à la membrane plasmique, internalise plus lentement et active moins bien la phospholipase C que le récepteur natif. Par contre, des expériences de fractionnement cellulaire ont démontré que seule une faible proportion des récepteurs natifs et mutants colocalise avec les cavéoles et que cette proportion n'est pas modifiée suite à la stimulation de ces récepteurs par l'Ang II. Par contre la modification du motif d'interaction à la cavéoline a diminué l'interaction avec DRIP78, une protéine chaperonne impliquée dans le routage du récepteur D[indice inférieur 1] de la dopamine vers la membrane plasmique, ce qui suggère que le motif d'interaction à la cavéoline n'est pas un domaine d'interaction exclusif à la cavéoline. Nous avons par la suite étudié si la S-nitrosylation, une modification post-traductionnelle induite par l'oxyde nitrique (NO) sur des résidus cystéines, était impliquée dans la régulation de l'activité du récepteur AT[indice inférieur 1]. Le traitement du récepteur AT[indice inférieur 1] avec du nitroprussiate de sodium (SNP), un donneur de NO, réduit l'affinité du récepteur AT[indice inférieur 1] pour l'Ang II. Cet effet est réversible et n'est pas dépendant de l'activation de la guanylyl cyclase ni du découplage du récepteur de sa protéine G. Toutefois, le SNP n'a plus d'effet sur un récepteur mutant où les cinq cystéines transmembranaires sont remplacées par des sérines. Le traitement au SNP d'un mutant où seule la cystéine en position 289 est remplacée par une sérine annule cette perte d'affinité. Nous avons finalement démontré que l'affinité du récepteur AT[indice inférieur 1] pouvait aussi être modulée par l'acide ascorbique (AA), une molécule aux propriétés oxydo-réductrices. Le traitement du récepteur AT[indice inférieur 1] avec l'AA réduit l'affinité du récepteur pour l'Ang II. Cette perte d'affinité se traduit par une diminution des oscillations calciques induites par des faibles doses d'Ang II. L'AA diminue aussi les contractions de bandelettes d'aorte de lapin induites par des faibles doses d'Ang II. L'AA n'influence pas les propriétés du récepteur AT[indice inférieur 2] de l'Ang II ni du récepteur UT de 1'urotensine II. Ensemble, ces résultats ont permis d'identifier de nouveaux mécanismes de régulation du récepteur AT[indice inférieur 1] , soit le motif de liaison à la cavéoline comme site d'ancrage de DRIP78 qui influence le routage intracellulaire du récepteur AT[indice inférieur 1] , la S-nitrosylation par les dérivés de l'oxide nitrique et la réduction par l'AA qui modulent l'affinité du récepteur AT[indice inférieur 1].
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