Origine et nature des cassures transitoires de l'ADN lors de la spermiogenèse

• Main Author: Laberge, Rémi-Martin
• Other Authors: Boissonneault, Guylain
• Language: French
• Published: Université de Sherbrooke 2004
• Online Access: http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/3375

Chez les mammifères, la phase haploïde de la spermatogenèse, ou spermiogenèse, est caractérisée par un important remodelage de la chromatine lors duquel, les histones seront remplacées provisoirement par les protéines de transition et finalement par les protamines. Ce passage de la chromatine vers un état beaucoup plus condensé, est essentiel au pouvoir fertilisant du spermatozoïde. Lors de ce remodelage des cassures dans l'ADN de tous les spermatides en élongation apparaissent. Leur présence permettrait d'enlever le superenroulement généré par l'empaquetage de l'ADN par les histones. Comme les spermatides et les spermatozoïdes n'ont pas de mécanisme efficace de réparation d'ADN, la présence et les mécanismes de formation de ces cassures représentent des sources potentielles d'instabilité génétique. Nous avons déterminé la nature de ces cassures ainsi que les mécanismes mis en cause dans leurs formations. Grâce à une technique dérivée du SCSA ª (sperm chromatin structure assay) il nous a été possible de séparer avec succès les différents types de spermatides. Nous avons pu déterminer qu'il s'agit de cassures doubles brins dans les spermatides en élongation grâce à un essai comet en condition alcaline et neutre. Nous avons également montré, en combinant l'inhibition in vivo et le marquage TUNEL (TdT dUTP Nick End Labelling), que la topoisomérase II est responsable de la formation de ces cassures. L'action de l'enzyme nécessite l'hyperacétylation des histones. Ces nouvelles informations aideront à la compréhension des causes d'infertilités idiopathiques associées à la présence de cassures dans les spermatozoïdes matures.