Caractérisation des régions régulatrices du promoteur du gène CYP11B2 de hamster

• Main Author: Coulombe, Nathalie
• Other Authors: LeHoux, Jean-Guy
• Language: French
• Published: Université de Sherbrooke 1997
• Online Access: http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/3138

Précédemment isolé d'une bibliothèque d'ADN génomique de hamster, le gène codant pour le cytochrome P450c18 ou aldostérone synthèse est contenu dans une région de 9045pb, incluant une région 5' non-codante (ou promoteur) de 3722pb. Plusieurs éléments ont été identifiés dans le promoteur dont la boîte TATA et les séquences-cis putatives Ad1 à Ad6. Un nouvel élément-cis putatif a été identifié, par footprint, entre -143pb et -161pb. Des expériences de retardation sur gel ont démontré que cette séquence est liée spécifiquement par des facteurs venant d'un extrait nucléaire de la zone glomérulée de la surrénale de hamster. L'activité transcriptionnelle du promoteur du gène CYP11B2 a été étudiée en utilisant le gène reporteur chloramphénicol acetyltransferase (CAT). Dix plasmides contenant différentes délétions du promoteur ont été construits avec un vecteur pCAT modifié. L'expression du gène reporteur de toutes les constructions, sauf celle contenant seulement la boîte TATA, a été stimulée par la forskolin, l'activité la plus élevée a été obtenue avec la construction contenant -134pb."--Résumé abrégé par UMI.