Recherche de gènes précocement induits par la matrice extracellulaire

• Main Author: Desloges, Nathalie
• Other Authors: Beaulieu, Jean-François
• Language: French
• Published: Université de Sherbrooke 1997
• Online Access: http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/3119

Dans la présente étude, nous avons analysé l'effet de matrices extracellulaires produites par les cellules Caco-2/15 riches en laminine-1, sur des cellules Caco-2/15/2, un clone dérive de la lignée Caco-2/15 qui exprime de faibles niveaux de sucrase-isomaltase, de lactase et de laminine-1. Ayant observé l'effet des matrices sur les niveaux de transcrits, nous avons pu utiliser ce système comme modèle pour rechercher des gènes précocement induits par la matrice extracellulaire. Cette technique permet la comparaison de deux ou plusieurs populations d'ARNm par amplification RT-PCR. Ainsi, il est possible de trouver les gènes induits dans certaines conditions (cellules cultivées sur les matrices) par rapport à d'autres conditions (cellules cultivées sur plastique). D'un autre côté, nous avons voulu analyser l'effet que pourrait avoir une absence de l'intégrine [alpha]6[bêta]4 sur les Caco-2/15. En plus d'être un récepteur spécifique de la laminine, cette intégrine est composée de la sous-unité [bêta]4 qui possède une queue cytoplasmique très longue comparativement aux autres sous-unités [bêta] ce qui place cette intégrine dans une position privilégiée pour son implication dans la transduction de signaux. Nous avons donc transfecté des anti-sens de chacune des deux sous-unités de cette intégrine dans les cellules Caco-2/15. Nous avons pu observer dans les cellules transfectées avec l'anti-sens de la sous-unité [bêta]4 une baisse de cette sous-unité au niveau protéique ainsi qu'une baisse de la sous-unité [alpha]6. Aucune baisse notable n'a été observée pour les cellules transfectées avec la sous-unité [alpha]6.--Résumé abrégé par UMI.