Modulation de l'expression des oncogènes du virus du polyome associés à un îlot riche en CpGs

• Main Author: Renzo, Alain
• Other Authors: Bastin, Marcel
• Language: French
• Published: Université de Sherbrooke 1989
• Online Access: http://hdl.handle.net/11143/12073

Les îlots HTFs (HpaII Tiny Fragments) sont des séquences riches en CpGs de 500 à 2000 pb qui représentent 1% du génome total. On les retrouve fréquemment en position 5' des gènes. Nous avons mesuré l'effet d'un HTF sur l'expression des oncogènes du virus du polyome dans un essai de tumorigenèse dans des rats nouveau-nés. Nos resultats indiquent que le HTF, plaçé en position 5' de l'ADN viral, diminue la tumorigénécité de ce dernier et retarde l'apparition des tumeurs. Nous avons aussi évalué l'effet d'un îlot HTF sur les événements de réversion de phénotype. Tout d’abord, nous avons observé qu’un îlot HTF, plaçé en 5' du gène T moyen de polyome, diminue de 5 fois l'efficacité de transformation de cellules FR3T3 par l'oncogène. Lorsque les cellules sont transformées par le gène T moyen seul, elles révertent à un phénotype non-transformé à une fréquence de 3 X 10-4 par cellule par génération. Parallèlement, des cellules transformées par le gène T moyen avec un HTF en 5' révertent à une fréquence 4 fois plus élévée, soit 1.2 X 10-3 par cellule par génération. Nous avons également observé que l'îlot HTF module l’expression du gène T moyen, indépendamment de sa position et de son orientation par rapport au gène. Nos résultats suggèrent aussi que l'influence du HTF sur les événements de réversion à haute fréquence se manifeste même lorsqu'il est situé à une distance de 3kb des premiers codons du gène. La délétion de 12 ou 13 sites HpaII (CCGG) sur 14 du HTF inhibe son action sur la réversion. Un autre mutant possédant une délétion de 3 à 6 sites HpaII dans le HTF conserve son potentiel sur la génération d'événements de réversion à haute fréquence. Plusieurs lignées révertantes contenant un HTF en 5' du gène T moyen perdent l’insert transfecté à haute fréquence. Cependant, ce phénomène ne semble pas être l'événement instigateur de la réversion de la majorité des lignées. Nous avons observé que quelques sites AvaI (CPyCGPuG) du HTF et/ou de T moyen étaient méthylés dans plusieurs lignées révertantes, contrairement aux sites dans les lignées transformées correspondantes. D'autre part, les lignées révertantes se retransforment aussi à un taux élevé. Ces résultats suggèrent que la méthylation du HTF serait responsable d'une bonne partie des événements de réversion à haute fréquence observés, possiblement via une inactivation transcriptionnelle du gène.