Séquence minimale requise pour la recombinaison intramoléculaire dans un réplicon hybride polyome/souris

• Main Author: Frappier, Danielle
• Other Authors: [non identifié]
• Language: French
• Published: Université de Sherbrooke 1989
• Online Access: http://hdl.handle.net/11143/12048

RmI est une molécule hybride contenant 1.03 copie du génome viral tsP155 (mutant du virus polyome), liée à une insertion cellulaire d'ADN de souris flanquée elle-même par des répétitions virales directes de 182 pb. Cette molécule peut se convertir en ADN viral génomique (tsP155) par recombinaison intramoléculaire entre les duplications virales. Dans ce travail, nous avons cherché à identifier le mécanisme de recombinaison responsable de la résolution de RmI. Pour ce faire, nous avons pratiqué des délétions dans les séquences virales de 182 pb présentes dans le plasmide pI-1 (RmI clonée dans pBR322). Le comportement des ADN mutants a été étudié dans un essai de recombinaison "in vivo" par transfection des fibroblastes de souris 3T6. Suite à une analyse des produits recombinants par la méthode de Southern (1975), soit directement soit après amplification "in vitro" ('PCR'), nous avons trouvé qu'il s'agit vraisemblablement d'une recombinaison de type homologue qui requiert une homologie minimale de ca. 50 pb pour se réaliser.