Sélection et caractérisation de cellules somatiques de souris résistantes au cadmium
Afin d'étudier la régulation de l'expression génétique des gènes métallothionéines (mt+), nous avons isolé et caractérisé des cellules somatiques de souris résistantes au cadmium (CdR) à partir de cellules sauvages 1LMTK. La sélection par étapes, à des concentrations croissantes de CdCl2,...
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Other Authors: | |
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Université de Sherbrooke
1985
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Online Access: | http://hdl.handle.net/11143/11732 |
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ndltd-usherbrooke.ca-oai-savoirs.usherbrooke.ca-11143-117322018-01-18T17:00:03Z Sélection et caractérisation de cellules somatiques de souris résistantes au cadmium Thibodeau, Jacques Thirion, Jean-Paul Afin d'étudier la régulation de l'expression génétique des gènes métallothionéines (mt+), nous avons isolé et caractérisé des cellules somatiques de souris résistantes au cadmium (CdR) à partir de cellules sauvages 1LMTK. La sélection par étapes, à des concentrations croissantes de CdCl2, a permis d'isoler 6 clones (1L15-6, 1L50-6, 1L100-6, 1L15-8, 1L50-8, 1L80-8) résistant à des concentrations de cadmium variant entre 15 et 100 uM. Ces clones sont entre 1,5 et 5,5 fois plus résistants que le type sauvage. Leur phénotype CdR n'est stable qu'en présence de cadmium. L'incorporation de cystéine-S35 dans les protéines démontre que la résistance au cadmium s'accompagne, dans ces mutants et dans ceux isolés par Claude Marengo en une seule étape, d'une synthèse plus grande des métallothionéines (MTs) par rapport aux cellules de types sauvages. Dans nos mutants sélectionnés par étapes, la production accrue des MTs est le résultat, tel que démontré par buvardage sudiste, de l'amplification des gènes mt-1+ dans tous les clones (sauf peut-être 1L15-6). Finalement, des expériences similaires démontrent aussi que 2 protéines, caractéristiques de la réponse au choc thermique (HS), sont aussi induites par le cadmium dans ces mêmes cellules de souris. 1985 Thèse http://hdl.handle.net/11143/11732 fre © Jacques Thibodeau Université de Sherbrooke |
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Afin d'étudier la régulation de l'expression génétique des gènes métallothionéines (mt+), nous avons isolé et caractérisé des cellules somatiques de souris résistantes au cadmium (CdR) à partir de cellules sauvages 1LMTK. La sélection par étapes, à des concentrations croissantes de CdCl2, a permis d'isoler 6 clones (1L15-6, 1L50-6, 1L100-6, 1L15-8, 1L50-8, 1L80-8) résistant à des concentrations de cadmium variant entre 15 et 100 uM. Ces clones sont entre 1,5 et 5,5 fois plus résistants que le type sauvage. Leur phénotype CdR n'est stable qu'en présence de cadmium. L'incorporation de cystéine-S35 dans les protéines démontre que la résistance au cadmium s'accompagne, dans ces mutants et dans ceux isolés par Claude Marengo en une seule étape, d'une synthèse plus grande des métallothionéines (MTs) par rapport aux cellules de types sauvages. Dans nos mutants sélectionnés par étapes, la production accrue des MTs est le résultat, tel que démontré par buvardage sudiste, de l'amplification des gènes mt-1+ dans tous les clones (sauf peut-être 1L15-6). Finalement, des expériences similaires démontrent aussi que 2 protéines, caractéristiques de la réponse au choc thermique (HS), sont aussi induites par le cadmium dans ces mêmes cellules de souris. |
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