Rôle de la phosphatase alcaline dans le transport des phosphates

• Main Author: Letellier, Marc
• Other Authors: [non identifié]
• Language: French
• Published: Université de Sherbrooke 1983
• Online Access: http://hdl.handle.net/11143/11644

Les activités de la phosphatase alcaline, la gamma-glutamyltransférase et la 5'nucléotidase sont respectivement 6, 2 et 9 fois plus élevées dans les vésicules de bordures en brosse de rein de rat comparé au hamster; tandis que le transport sodium dépendant de phosphate inorganique n'y est que 50% plus élevé. Les inhibiteurs de la phosphatase alcaline tel le cyanure et le bromotétramisole n'inhibent pas le transport sodium dépendant du phosphate inorganique dans les vésicules de bordures en brosse de rein de rat. Ces résultats montrent que la phosphatase alcaline n'est pas le transporteur du phosphate inorganique et qu'elle n'est apparemment pas impliquée dans le transport du phosphate inorganique dans les vésicules de bordures en brosse. L'étude de la variation de la concentration en phosphate inorganique sur le transport sodium dépendant de phosphate laisse supposer la présence de deux transporteurs d'affinités différentes dans les vésicules de bordures en brosse de rein de rat et de hamster. Le hamster est particulièrement déficient dans sa composante haute affinité. Les études de transport d'?-glycérophosphate et de pyrophosphate dans les vésicules de bordures en brosse montrent qu'il y a d'abord hydrolyse du substrat et un transport sodium dépendant subséquent du phosphate inorganique libéré. Mais l'efficacité du transport est telle qu'il faut supposer un couplage entre les deux phénomènes. Ce transport est évidemment inhibé par les inhibiteurs de la phosphatase alcaline. L'?-glycérophosphate et le pyrophosphate, substrats et inhibiteurs compétitifs de la phosphatase alcaline, n'inhibent pas le transport sodium dépendant de phosphate inorganique dans les vésicules de bordures en brosse de rein de rat aux concentrations utilisées. L'arséniate et le EHDP (éthane-1-hydroxy-1, 1-diphosphonate), deux autres inhibiteurs compétitifs de la phosphatase alcaline, inhibent cependant le transport sodium dépendant de phosphate inorganique. D'une part, l'arséniate est transporté de manière sodium dépendante dans les vésicules. D'autre part, le EHDP qui n'est vraisemblablement pas transporté est un inhibiteur non compétitif du transport sodium dépendant du phosphate inorganique. Les cellules en culture MDCK (Madin, Darby, Canine, Kidney) possèdent de la phosphatase alcaline et une activité transport sodium dépendant de phosphate inorganique. L'activité de la phosphatase alcaline augmente d'un facteur 37 du deuxième jour de culture jusqu'au huitième pour se stabiliser par la suite. Par contre, le transport de phosphate inorganique est maximal au deuxième jour, diminue ensuite d'un facteur 2 jusqu'au quatrième jour pour devenir constant par la suite. À première vue, ces résultats semblent indiquer que la phosphatase alcaline n'est pas impliquée dans le transport de phosphate inorganique dans les cellules MDCK. Mais le bromotétramisole, inhibiteur de la phosphatase alcaline, inhibe à 45% le transport sodium dépendant du phosphate inorganique à 3 jours de culture là où l'activité de la phosphatase alcaline est du même ordre de grandeur que celle du transport. Cette inhibition disparait sur des cultures de 7 jours, où l'activité de la phosphatase est 40 fois plus grande. Il est donc possible de mettre en évidence un couplage de l'activité de la phosphatase alcaline à celle du transport du phosphate inorganique dans les cellules MDCK, corroborant l'observation faite sur les vésicules de bordures en brosse en présence de phosphates organiques. À la lumière de toutes les observations faites à ce jour tant sur la phosphatase alcaline que sur le transport du phosphate inorganique, il est possible de penser que la phosphatase alcaline fait partie d'un complexe multiprotéines organisé autour d'un canal ionique en y jouant le rôle de régulateur de l'entrée du phosphate inorganique.