Οχήματα γονιδιακής μεταφοράς για τη γονιδιακή θεραπεία των αιμοσφαιρινοπαθειών

• Main Author: Πολυβίου, Σταύρος
• Other Authors: Αθανασιάδου, Αγλαΐα
• Language: gr
• Published: 2007
• Subjects: Γονιδιακή θεραπεία; Οχήματα; Φορείς; Επίσωμα; Αιμοσφαιρινοπάθειες; 616.042; Gene therapy; Vehicles; Vectors; Episome; Hemoglobinopathies; hβ-SMAR(Α); pEPI
• Online Access: http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/454

Τα επισωματικά οχήματα γονιδιακής μεταφοράς αποτελούν ελκυστική εναλλακτική πειραματική προσέγγιση της γονιδιακής θεραπείας σε σχέση με τα ιϊκά οχήματα. Στην παρούσα εργασία και στο πλαίσιο της ανάπτυξης επισωματικών οχημάτων για την γονιδιακή θεραπεία των αιμοσφαιρινοπαθειών, μελετάται το όχημα hβ-SMAR(Α), ένα κυκλικό πλασμίδιο, που φέρει το γονίδιο της ανθρώπινης β-σφαιρίνης και το μLCR και βασίζεται σε ανθρώπινα χρωμοσωμικά στοιχεία, το S/MAR στοιχείο από την περιοχή 5’ του γονιδίου της ανθρώπινης ιντερφερόνης β. Διαπιστώθηκε ότι το hβ-SMAR(Α) συγκρατήθηκε εντός της διαμολυσμένης κυτταρικής σειράς MEL για περισσότερες από 300 γενιές με διαπιστωμένη την επισωματική του κατάσταση για τουλάχιστο 180 γενιές. Επιπλέον, διατήρησε υψηλά επίπεδα έκφρασης του διαγονιδίου, τα οποία θα αντιστοιχούσαν σε θεραπευτικά επίπεδα, αν αναπαράγονταν in vivo. === Episomal vehicles for gene transfer are an attractive alternative experimental approach to gene therapy in the place of viral vectors. The vehicle hβ-SMAR(Α) studied here, within the context of developing efficient episomal vectors for the gene therapy of hemoglobinopathies, is a circular plasmid bearing the human β globin gene and the μLCR and is based on human chromosomal elements, the S/MAR element from the region 5’ of the human interferon β gene. It was established that hβ-SMAR(Α) was retained within the transfected MEL cell line for more than 300 generations, with its episomal state ascertained for at least 180 generations. Furthermore, it retained high level expression of the transgene, which would be therapeutic, if reproduced in vivo.