Expressão gênica e protéica de receptores Toll-like em células do sangue periférico materno de gestações normais e complicadas por prematuridade /

• Main Author: Moço, Natália Prearo.
• Other Authors: Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Faculdade de Medicina.
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Botucatu, 2015
• Subjects: Citometria de fluxo.; Imunidade natural.; Reação em cadeia da polimerase.; Receptores Toll-like.; Expressão gênica.; Gravidez.; Parto (Obstetricia); Toll-Like Receptors.; Delivery (Obstetrics)
• Online Access: http://hdl.handle.net/11449/139348

Orientador: Márcia Guimarães da Silva === Banca: Luciane Alarcão Dias-Melicio === Banca: Roseane Mattar === Banca: Leandro Oliveira === Banca: Gisele Alborghetti Nei === Resumo: Introdução: A prematuridade é a principal causa de mortalidade neonatal e os riscos de complicações decorrentes são inversamente proporcionais à idade gestacional na qual o parto ocorre. Diversos estudos na literatura demonstram o papel da resposta imune inata e dos receptores Toll-like (TLRs) durante a gestação normal e na presença de complicações gestacionais. A expressão de TLRs vem sendo avaliada principalmente nos tecidos da interface materno-fetal e os resultados de tais estudos são conflitantes. A investigação da expressão de TLRs em tecidos gestacionais é de grande importância para o entendimento da participação da imunidade inata em gestações normais e com desfechos gestacionais adversos, porém tais tecidos permitem análise somente após a resolução da gestação. Nesse contexto, uma possível fonte de estudo para análise de TLRs no decorrer da gestação em curso são as células do sangue periférico materno, uma vez são facilmente obtidas por punção venosa, além de possuírem papel fundamental na reposta imune inata e expressarem diversos tipos de TLRs. Objetivo: Traçar o perfil de expressão gênica e proteica de receptores Toll-like 1, -2, -4 e -6 em células mononucleares (PBMCs) e em neutrófilos do sangue periférico materno ao longo da gestação normal e na prematuridade. Materias e métodos: Foram incluídas no estudo 119 gestantes normais, as quais foram subdivididas em trimestres de acordo com sua idade gestacional. Além disso, foram avaliadas 20 gestantes em trabalho de parto pré-termo e 18 gestantes de termo. A análise de expressão gênica foi realizada por PCR em tempo real e a avaliação da expressão proteica por citometria de fluxo. Para a análise dos dados foram empregados os testes não paramétricos de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney através do software SigmaStat 3.1. Resultados: Em relação às PBMCs, não foram observadas diferenças significativas nas expressões gênica e... === Abstract: Introduction: Prematurity is the leading cause of neonatal mortality and serious neonatal morbidity worldwide and the risk is inversely proportional to gestational age at birth. Several studies demonstrate the role of innate immune response and Toll-like receptors (TLRs) in normal and complicated pregnancies, however most studies have focused on the tissues of the maternal-fetal interface. Research of the expression of TLRs in gestational tissues is of great importance for understanding the involvement of innate immunity in normal pregnancies and adverse pregnancy outcomes, but the analysis of these tissues allows for results only after the complete resolution of gestation. In this scenario, a potential biological sample of interest for analysis of TLRs in the ongoing gestation are maternal peripheral blood cells, since they play a crucial role in the immune system and express high levels of many of the TLRs. Main: Evaluate the profile of gene expression of TLR-1, -2, -4 and -6 in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and polymorphonuclear cells (PMNs) and compare these expressions between preterm and term pregnancies. Materials and methods: 119 normal pregnant women were included in the study, subdivided into three groups according to the gestational trimester. In addition, 20 pregnant women in preterm labor and 18 pregnant women at term were evaluated. Gene expression analysis was performed by real-time PCR and protein expression evaluation by flow cytometry. Statistical analyses were performed using the nonparametric Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests by SigmaStat 3.1 software. Results: Regarding PBMCs, there were no significant differences in gene and protein expressions of TLR-1, TLR-2, TLR-4 and TLR-6 among the trimesters. The same was observed when comparing PBMCs of preterm and term pregnancies. In relation to neutrophils, gene and protein expressions of TLR-1, TLR-2, TLR-4 and TLR-6 remained unchanged throughout normal ... === Doutor