| Summary: | Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista === INTRODUCCIÓN: La caries dental es una enfermedad crónica compleja y
multifactorial, de componente infeccioso y de alta prevalencia en el ser humano.
Se desarrolla producto de la interacción en el tiempo de una producción de ácidos
a partir del metabolismo bacteriano, los dientes y la saliva. La microbiota que
interactúa en este proceso es muy diversa. Estudios recientes han identificado a
miembros de la familia Bifidobacteriaceae como microorganismos participantes de
este proceso. Estos estudios son, en su mayoría, en adultos, y no existen análisis
que relacionen estos microorganismos con niños. Por otra parte, las bacterias
cariogénicas deben presentan mecanismos de patogenicidad para producir la
enfermedad, entre los que se han descrito la aciduria, acidogénesis y la adhesión,
todas codificadas por genes. En el presente estudio se buscará la presencia de
estos mecanismos a partir de los genes ldh, gadB y spaA.
OBJETIVO: Determinar la presencia de miembros de la familia Bifidobacteriaceae
en saliva y caries de niños Chilenos entre 7 y 11 años de edad y analizar los
genes que codifican para los factores de virulencia ldh, gadB y spaA.
METODOLOGÍA: Mediante examen clínico, se seleccionó un grupo de 18 niños, 9
niños sin experiencia de caries y 9 con experiencia de caries. Se tomaron muestras
de saliva de ambos grupos y muestras de sitio con caries en dentina a niños con
experiencia de caries. Se procedió a realizar cultivos en medio MTPY, selectivo para
Bifidobacteriaceae. Se aisló ADN genómico desde aislados clínicos seleccionados
al azar, se realizó PCR para amplificar un fragmento del ADN del gen 16S ARNr y
fueron enviados para su secuenciación. El análisis de estas secuencias permitió
identificar las especies presentes en cada muestra. La presencia de los factores
de virulencia se realizó por PCR, utilizando partidores específicos para cada gen
en análisis (ldh, gadB y spaA).
RESULTADOS: Se detectó Parascardovia denticolens, miembro de la familia
Bifidobacteriaceae, en el 5,6% de los niños estudiados (n=18). Mediante PCR se
determinó que de los aislados clínicos obtenidos, el 50% dió positivo para el factor
de virulencia ldh mientras que para los factores de virulencia gadB y spaA no fue
posible obtener un amplificado positivo. No se obtuvieron aislados clínicos para otras
especies de Bifidobacteriaceae. La especie Actinomyces odontolyticus fue
encontrada abundantemente en muestras de saliva del grupo de niños con
experiencia de caries y sin experiencia de caries. Se determinó una asociación
estadísticamente significativa de este microorganismo a las muestras de saliva de
ambos grupos, al comparar con su presencia en los sitios con caries (p=0,01 y
p=0,001). Rothia mucilaginosa se encontró asociada a las muestras de saliva en
ausencia de experiencia de caries al comparar con su presencia en sitios con
caries (p=0,001).
CONCLUSIONES: En niños Chilenos entre 7 y 11 años sólo fue posible detectar
la presencia de P. denticolens desde sitios con caries, única especie de los siete
géneros de la familia Bifidobacteriaceae.
Los aislados clínicos de P. denticolens codifican el gen Idh en un 50% de los
aislados, mientras que no codifican para los genes spaA y gadB, por lo que estos
aislados no usarían estos mecanismos descritos para la adhesión y resistencia de
ambientes ácidos.
Se encontraron otras especies bacterianas asociadas al tipo de muestra, como A.
odontolyticus encontrada en saliva tanto de niños libres de caries como con
experiencia de caries. De este mismo modo existen especies bacterianas
relacionadas a la ausencia de caries, como R. mucilaginosa. === Adscrito a Proyecto U-inicia difarp 40/13, VID, U. de Chile
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