Direct involvement of the tumor suppressor p53 in nucleotide excision repair
博士 === 國立清華大學 === 分子醫學研究所 === 96 === 抑癌基因P53可以促進細胞修補紫外線所造成的DNA損傷。在本實驗中利用彗星-核萃取物分析法(藉由鹼性彗星分析法引進核萃取物切割的動作)來測試P53對於核萃取物切割能力之影響。相對於未做任何處理之核萃取物，利用免疫耗竭方式由核萃取物中移除P53或是不含P53的細胞核取萃物無法去切割紫外線造成之DNA損傷。利用P53穩定性轉染之不含P53細胞的核萃取物可以回復其切割的活性。切除P53 N端99個及C端75個胺基酸不會影響其切割之活性，然而再多切除C端20個胺基酸則會完全抑制其切割之活性。利用局部紫外線照射後進行免疫染色的方法...
| Main Authors: | , |
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| Other Authors: | |
| Format: | Others |
| Language: | en_US |
| Published: |
2008
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| Online Access: | http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/28294344100766066603 |
| Summary: | 博士 === 國立清華大學 === 分子醫學研究所 === 96 === 抑癌基因P53可以促進細胞修補紫外線所造成的DNA損傷。在本實驗中利用彗星-核萃取物分析法(藉由鹼性彗星分析法引進核萃取物切割的動作)來測試P53對於核萃取物切割能力之影響。相對於未做任何處理之核萃取物，利用免疫耗竭方式由核萃取物中移除P53或是不含P53的細胞核取萃物無法去切割紫外線造成之DNA損傷。利用P53穩定性轉染之不含P53細胞的核萃取物可以回復其切割的活性。切除P53 N端99個及C端75個胺基酸不會影響其切割之活性，然而再多切除C端20個胺基酸則會完全抑制其切割之活性。利用局部紫外線照射後進行免疫染色的方法來研究P53如何影響核酸切除修復中修補蛋白質聚集之情形。雖然XPC之聚集與P53的存在與否無關，但XPB則與P53有關。當切除P53 C端95個胺基酸則XPB無法聚集。同樣的,利用共免疫沈澱方法發現只有完整的P53或是切除P53 C端75個胺基酸會和XPB一起被抗體抓下來，而P53 C端切除95個胺基酸的則不會。這些結果支持我們的假設，P53是藉由蛋白質之間的交互作用直接來促進核酸切除修復。
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