Studies on the Quality Control Method of Angelica keiskei

• Main Authors: yu-fang Chang, 張玉芳
• Other Authors: gan-lin Chen
• Format: Others
• Language: zh-TW
• Published: 2001
• Online Access: http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/13182974881014508135

碩士 === 中國醫藥學院 === 中國藥學研究所 === 89 === Abstract It has been reported that the chemical components and biological activities of Angelica keiskei include anticholesterogic, immunologic -potential, antibacterial, anticancer, antithrombotic effects as well as inhibiting gastric H+, K+, -ATPase and antiulcer activity in pigs（1）. This study of Angelica keiskei, from four different locations, focuses on roots, stems, leaves and fruit. First of all using a TLC analysis with isolated marker components, 4-hydroxyderricin and xanthoangelol, shows the fact that Angelica keiskei contains these components in all four locations of the plants. Secondly, by using HPLC analysis, the result also shows these components in the four different plant locations. Therefore, both TLC and HPLC analyses with isolated marker compon- ents, 4-hydroxyderricin and xanthoangelol are used as a reference. SOD (superoxide dismutase) test and total antioxidant status of crude extracts are also used to determine the ability to eliminate free radicals and the effect of antioxidant raising. The result shows Angelica keiskei in all 4 locations have the ability in eliminating free radicals and rasing antioxidant effect as predicted, among which leaves and fruit are the best. Leaves of the Angelica kei- skei herbs gathered from Hsi-Tou show the best result in the ability to eliminate free radicals. Its activity is (6643 U/g FW). The fruit gathered from Fen-Chi-Ho, Ah-Li-Sen, Cha-Yi area contains the highest dose of ( 4638 U/g FW). As comparing from the total antioxi- dant status, the leaf from Fen-Chi-Ho Ah-Li-Sen valued ( 551μg /g FW) and the fruit valued (400μg /g FW) are the best. The purpose of the study is looking for a fast, stable,senstive and specific analytical method for specification of Angelica keiskei and its derivative products. This investigation offers an usful method for quality control and a reference for developing Chinese herbal medicine. 頁數 內文目錄--------------------------------------------------------------------------- 附表目錄--------------------------------------------------------------------------- 附圖目錄. -------------------------------------------------------------------------- 中文摘要--------------------------------------------------------------------------- 英文摘要--------------------------------------------------------------------------- 第一章 總論 第一節 前言------------------------------------------------------------------1 第二節 明日葉的研究概況------------------------------------------------3 一、明日葉的文獻記載------------------------------------------3 二、明日葉的藥用植物學考察---------------------------------4 三、明日葉的化學成分考察------------------------------------7 四、明日葉及其化學成分的藥理考察-----------------------16 五、自由基與超歧氧化脢的作用-----------------------------19 第三節 研究動機與目的--------------------------------------------------25 第二章 實驗材料及方法 第一節 實驗材料-----------------------------------------------------------27 第二節 實驗儀器-----------------------------------------------------------30 第三節 實驗方法------------------------------------------------------------32 一、明日葉組織切片---------------------------------------------32 二、明日葉含水量測定------------------------------------------32三、明日葉的指標成分之光譜分析----------------------------33 四、明日葉總抗氧化力測試方法------------------------------35 五、超歧氧化脢（SOD）清除自由基能力測試方法-------36 第三章 結果與討論 一、明日葉的組織切片鑑定-----------------------------------------38 二、明日葉的含水量--------------------------------------------------38 三、明日葉的指標成分之結構判定--------------------------------39 四、明日葉指標成分的TLC及HPLC分析結果---------------41 五、明日葉總抗氧化力----------------------------------------------- 六、明日葉之超歧氧化脢清除自由基能力----------------------- 第四章 結論----------------------------------------------------------------------45 參考文獻--------------------------------------------------------------------------46 附 表 目 錄 表 1. 明日葉的成分與主要功能---------------------------------------------56 表 2. 明日葉的coumarin、chalcone 類成分1-8，以不同濃度對加 有促癌物質（TPA）之細胞磷脂質的抑制作用--------------------57 表 3. 明日葉之中xanthoangelol(I) 與4-hydroxyderrcin(II)及gentami- cin的抑制細菌活性之比較-------------------------------------------58 表 4. 明日葉之成分中xanthoangelol(I)與4-hydroxyderrcin(II)及streptomycin sulfate之的抑制細菌活性之比較-------------------59 表 5. Xanthoangelol E作用在兔子胃黏膜中釋放PGE2, DKE2, PGF2α，DKF2α 比較---------------------------------------------------59 表 6. 明日葉與其他蔬菜的營養比較----------------------------------------60 表 7. SOD藥理研究報告摘要-------------------------------------------------61 表 8. 不同產地不同部位明日葉之含水量百分比比較表----------------62 表 9. 1 H NMR data for 4-hydroxyderricin-----------------------------------63 表10. 13C NMR data for 4-hydroxyderricin----------------------------------64 表11. 13C NMR data for 4-hydroxyderricin----------------------------------65 表12. 13C NMR data for xanthoangelol---------------------------------------66 表13. 不同部位不同溶媒明日葉之抽出物重量比較表-----------------67 表14. 明日葉不同產地不同部位甲醇萃取之HPLC顯示出波峰之 面積比--------------------------------------------------------------------68 表15. 嘉義阿里山奮起湖明日葉以不同溶媒萃取明日葉之HPLC 波峰之面積比-----------------------------------------------------------69 表16. 不同產地不同部位明日葉之總抗氧化力活性比較表------------70 表17. 不同產地不同部位明日葉的延遲時間與L-ascorbic acid標準 曲線濃度重量換算-----------------------------------------------------71 表18. 不同產地不同部位明日葉之似超氧岐化脢活性------------------72 附 圖 目 錄 圖 1. 明日葉生長環境之溫度比較------------------------------------------73 圖 2. 4-hydroxyderricin和xanthoangelol對於癌症被抑制的情形----74 圖 3. Xanthoangelol的抗潰瘍作用------------------------------------------75 圖 4. 明日葉chalcone中xanthoangelol E成分抑制血小板凝集機轉-76 圖 5. 明日葉植物圖------------------------------------------------------------77 圖 6. 明日葉植物圖------------------------------------------------------------77 圖 7. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉（F C）種植場---------------78 圖 8. 苗栗縣大湖鄉神農農場明日葉（ＭＬ）植物圖-------------------78 圖 9. 南投縣埔里鎮大雪山農場（ＰＬ）種植場--------------------------79 圖 10. 苗栗縣大湖神農農場（ＭＬ）種植場------------------------------79 圖 11. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉-表皮組織切片圖-----------80 圖 12. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉-種子組織切片圖-----------80 圖 13. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉-葉脈組織切片圖-----------81 圖 14. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉-根中心柱組織切片圖-----81 圖 15.不同產地之明日葉根、莖、葉含水百分比之比較圖--------------82 圖 16. 1H NMR spectrum of 4-hydroxyderricin------------------------------83 圖 17. 13C NMR spectrum of 4-hydroxyderricin-----------------------------84 圖 18. EIMS spectrum of xanthoangelol---------------------------------------85 圖 19. 1H NMR spectrum of xanthoangelol-----------------------------------86 圖 20. 13C NMR spectrum of xanthoangelol----------------------------------87 圖 21. 13C DEPT spectrum of xanthoangelol----------------------------------88 圖 22. 2D 13C 1H COSY spectrum of xanthoangelol-----------------------89 圖 23. 2D 13C 1H COSY spectrum of xanthoangelol （δC 100-150，δH 5-8.2 ppm）-----------------------------------90 圖 24. 不同產地之明日葉根、莖、葉以不同溶媒抽出物重量比較圖--91 圖 25. 不同產地之明日葉根、莖、葉抽出物之TLC圖-------------------92 圖 26. 指標成分4-hydroxyderricin（HD）之HPLC層析圖---------------93 圖 27. 指標成分xanthoangelol（XA）之HPLC層析圖-------------------94 圖 28. 4-hydroxyderricin與xanthoangelol混合之HPLC層析圖--------95 圖 29. 兩種指標成分與苗栗大湖神農農場之明日葉混合之HPLC 層析圖---------------------------------------------------------------------95 圖 30. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖部甲醇抽出物之HPLC 層析圖--------------------------------------------------------------------96 圖 31. 溪頭森林遊樂區之明日葉莖部甲醇抽出物之HPLC層析圖--96 圖 32. 南投縣埔里鎮大雪山農場之明日葉莖部之HPLC層析圖-----97 圖 33. 苗栗大湖神農農場之明日葉莖部之HPLC層析圖---------------97 圖 34. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根部之HPLC層析圖------98 圖 35. 溪頭森林遊樂區之明日葉根部之HPLC層析圖------------------98 圖 36. 縣埔里鎮大雪山農場之明日葉根部之HPLC層析圖------------99 圖 37. 苗栗大湖神農農場之明日葉根部之HPLC層析圖---------------99 圖 38. 指標成分xanthoangelol （XA）之HPLC層析圖------------------100 圖 39. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉部之HPLC層析圖----100 圖 40. 溪頭森林遊樂區之明日葉-葉部之HPLC層析圖----------------101 圖 41. 南投縣埔里鎮大雪山農場之明日葉-葉部之HPLC層析圖----101 圖 42. 指標成分xanthoangelol（XA）之HPLC層析圖-----------------102 圖 43. 苗栗大湖神農農場之明日葉葉部之HPLC層析圖--------------102 圖 44. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉果實之HPLC層析圖-----103圖 45. 南投縣埔里鎮大雪山農場之明日葉果實之HPLC層析圖-----103 圖 46. 苗栗大湖神農農場之明日葉果實之HPLC層析圖--------------104 圖 47. 指標成分xanthoangelol （XA）之HPLC層析圖--------------104 圖 48. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖部正己烷之HPLC層 析圖--------------------------------------------------------------------105 圖 49. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖部乙酸乙酯之HPLC層 析圖------------------------------------------------------------------------105 圖 50. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖部甲醇之HPLC層析圖-----------------------------------------------------------------------------105 圖 51. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖部氯仿之HPLC層析圖-----------------------------------------------------------------------------105 圖 52. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖部丙酮之HPLC層析圖------------------------------------------------------------------------------105 圖 53. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖部乙醇之HPLC層析圖------------------------------------------------------------------------------105 圖 54. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根部正己烷之HPLC層析圖----------------------------------------------------------------------------106 圖 55. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根部乙酸乙酯之HPLC層析圖------------------------------------------------------------------------106 圖 56. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根部甲醇之HPLC層析圖------------------------------------------------------------------------------106 圖 57. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根部氯仿之HPLC層析圖-----------------------------------------------------------------------------107 圖 58. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根部丙酮之HPLC層析圖------------------------------------------------------------------------------107 圖 59. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根部乙醇之HPLC層析圖-----------------------------------------------------------------------------107 圖 60. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉部正己烷之HPLC層析圖---------------------------------------------------------------------------108 圖 61. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉部乙酸乙酯之HPLC層析圖------------------------------------------------------------------------108 圖 62. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉部甲醇之HPLC層析圖------------------------------------------------------------------------------108 圖 63. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉部氯仿之HPLC層析圖-----------------------------------------------------------------------------109 圖 64. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉部丙酮之HPLC層析圖-----------------------------------------------------------------------------109 圖 65. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉部乙醇之HPLC層析圖------------------------------------------------------------------------------109 圖 66. 指標成分xanthoangelol（XA）之HPLC層析圖-------------------109 圖 67. L-Ascorbic acid與ABTS之關係圖----------------------------------110 圖 68. L-Ascorbic acid 100μM之標準曲線圖-----------------------------110 圖 69. L-Ascorbic acid 200μM之標準曲線圖-----------------------------110 圖 70. L-Ascorbic acid 300μM之標準曲線圖-----------------------------111 圖 71. L-Ascorbic acid 400μM之標準曲線圖-----------------------------111 圖 72. L-Ascorbic acid 600μM之標準曲線圖-----------------------------111 圖 73. L-Ascorbic acid 1000μM之標準曲線圖---------------------------112 圖 74. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖之總抗氧化力活性圖-112 圖 75. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根之總抗氧化力活性圖-112 圖 76. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉之總抗氧化力活性圖-113 圖 77. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉果之總抗氧化力活性圖-113 圖 78. 溪頭森林遊樂區之明日葉莖之總抗氧化力活性圖-------------113 圖 79. 溪頭森林遊樂區之明日葉根之總抗氧化力活性圖-------------114 圖 80. 溪頭森林遊樂區之明日葉葉之總抗氧化力活性圖-------------114 圖 81. 南投縣埔里鎮大雪山農場之明日葉莖之總抗氧化力活性圖-114 圖 82. 南投縣埔里鎮大雪山農場之明日葉根之總抗氧化力活性圖-115 圖 83. 南投縣埔里鎮大雪山農場之明日葉葉之總抗氧化力活性圖-115 圖 84. 南投縣埔里鎮大雪山農場之明日葉果之總抗氧化力活性圖-115 圖 85. 苗栗大湖神農農場之明日葉莖之總抗氧化力活性圖----------116 圖 86. 苗栗大湖神農農場之明日葉根之總抗氧化力活性圖----------116 圖 87. 苗栗大湖神農農場之明日葉葉之總抗氧化力活性圖----------116 圖 88. 苗栗大湖神農農場之明日葉果之總抗氧化力活性圖----------117 圖 89. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊、溪頭森林遊樂區、南投縣埔里鎮大雪山農場、苗栗大湖神農農場等不同產地明日葉之根、莖、葉、果實，總抗氧化力比較圖----------------------------------118 圖90. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉莖之似氧超歧化脢活性關係圖----------------------------------------------------------------------119 圖91. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉根之似氧超歧化脢活性關係圖-----------------------------------------------------------------------119 圖92. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉葉之似氧超歧化脢活性關係圖----------------------------------------------------------------------119 圖93. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊明日葉果之似氧超歧化脢活性關係圖--------------------------------------------------------------------120 圖94. 溪頭森林遊樂區明日葉莖之似氧超歧化脢活性關係圖--------120 圖95. 溪頭森林遊樂區明日葉根之似氧超歧化脢活性關係圖--------120 圖96. 溪頭森林遊樂區明日葉葉之似氧超歧化脢活性關係圖--------121 圖97. 溪頭森林遊樂區明日葉果之似氧超歧化脢活性關係圖--------121 圖98. 南投縣埔里鎮大雪山農場明日葉莖之似氧超歧化脢活性關係圖----------------------------------------------------------------------------121 圖 99. 南投縣埔里鎮大雪山農場明日葉根之似超氧歧化脢活性關係圖--------------------------------------------------------------------------122 圖100. 南投縣埔里鎮大雪山農場明日葉葉之似超氧歧化脢活性關係圖-----------------------------------------------------------------------122 圖101. 南投縣埔里鎮大雪山農場明日葉果之似超氧歧化脢活性關係圖-----------------------------------------------------------------------122 圖102. 苗栗大湖神農農場之明日葉明日葉莖之似超氧歧化脢活性關係圖--------------------------------------------------------------------123 圖103. 苗栗大湖神農農場之明日葉明日葉根之似超氧歧化脢活性關係圖-------------------------------------------------------------------123 圖104. 苗栗大湖神農農場之明日葉明日葉葉之似超氧歧化脢活性關係圖--------------------------------------------------------------------123 圖105. 苗栗大湖神農農場之明日葉明日葉果之似超氧歧化脢活性關係圖-------------------------------------------------------------------124 圖106. 嘉義阿里山奮起湖龍雲山莊、溪頭森林遊樂區、南投縣埔里鎮大雪山農場、苗栗大湖神農農場等不同產地明日葉之根、莖、葉、果之似超氧歧化脢活性比較關係圖--------------------125