Biochemcial,pharmacological and structure characterization of AMPA receptors from porcine brain

博士 === 國立清華大學 === 生命科學研究所 === 84 === AMPA receptors 主導哺乳動物中樞神經系統中快速的興奮性神經傳遞,同 時亦參與學習與記憶的分子機轉.雖然AMPA receptors 在分子生物學上 已有很大的進展,但對其生化特性和結構的瞭解則較少.本論文則針對豬腦 中溶解出的AMPA receptors 進行純化並研究其生化特性和結構特徵.利 用 non-ionic detergent,Triton X-114 可以自豬腦 synapti...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: Wu,Tzong Yuan, 吳宗遠
Other Authors: Chang,Yen Chung
Format: Others
Language:zh-TW
Published: 1996
Online Access:http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/88045311205895717312
Description
Summary:博士 === 國立清華大學 === 生命科學研究所 === 84 === AMPA receptors 主導哺乳動物中樞神經系統中快速的興奮性神經傳遞,同 時亦參與學習與記憶的分子機轉.雖然AMPA receptors 在分子生物學上 已有很大的進展,但對其生化特性和結構的瞭解則較少.本論文則針對豬腦 中溶解出的AMPA receptors 進行純化並研究其生化特性和結構特徵.利 用 non-ionic detergent,Triton X-114 可以自豬腦 synaptic junct選 擇性溶解出AMPA receptors 和少量的 kainate receptors,但不會溶解? receptors.將此溶解出的產物經過 anion exchange chromatography 可 以兩類具L-glutamate 結合活性的蛋白.其中一類的蛋白經wheat-germ agglu affinity chromatography 和 linear sucrose density gradient centri ,可以純化出AMPA receptors.而另一類的蛋白經相同的 純化步驟,除了AMPA外,亦含有kainate receptors,雖然它們的藥理特性都 顯示出AMPA recepto經SDS-PAGE和銀染分析顯示純度達80%以上的106KDa polypeptides 為豬腦 receptors 的組成蛋白.此106KDa polypeptide 除 了可被anti-rat GluR1, antibodies 認得外亦可被wheat germ agglutinin 和concanavalin A認得 N-glycosidase F 的作用顯示此 polypeptides 為一帶有7KDa醣類的醣蛋白結合chemical cross-linking 和hydrodynamic properties 的計算,我?receptors 為一tetrameric proteins. Non-reducing SDS-PAGE和Western ynaptic junction 上的 AMPA receptors指出AMPA receptors subunits 間 且藉其連結成dimer, trimer,and tetramaer.以detergents 自synaptic j悒XAMPA receptors 的過成會影響到AMPA receptors 的構型,增加subunits峖?而這個因溶解 過程對AMPA receptors 所產生的微擾可以在此步奏驟中蚆蚹K.雖然此雙 硫鍵構造的改變不會影響AMPA receptors 和L-glutamate銋鞝MPA receptors channel 特性的影響則有待進一步的探討.