Summary: | 博士 === 國立清華大學 === 生命科學研究所 === 84 === AMPA receptors 主導哺乳動物中樞神經系統中快速的興奮性神經傳遞,同
時亦參與學習與記憶的分子機轉.雖然AMPA receptors 在分子生物學上
已有很大的進展,但對其生化特性和結構的瞭解則較少.本論文則針對豬腦
中溶解出的AMPA receptors 進行純化並研究其生化特性和結構特徵.利
用 non-ionic detergent,Triton X-114 可以自豬腦 synaptic junct選
擇性溶解出AMPA receptors 和少量的 kainate receptors,但不會溶解?
receptors.將此溶解出的產物經過 anion exchange chromatography 可
以兩類具L-glutamate 結合活性的蛋白.其中一類的蛋白經wheat-germ
agglu affinity chromatography 和 linear sucrose density
gradient centri ,可以純化出AMPA receptors.而另一類的蛋白經相同的
純化步驟,除了AMPA外,亦含有kainate receptors,雖然它們的藥理特性都
顯示出AMPA recepto經SDS-PAGE和銀染分析顯示純度達80%以上的106KDa
polypeptides 為豬腦 receptors 的組成蛋白.此106KDa polypeptide 除
了可被anti-rat GluR1, antibodies 認得外亦可被wheat germ
agglutinin 和concanavalin A認得 N-glycosidase F 的作用顯示此
polypeptides 為一帶有7KDa醣類的醣蛋白結合chemical cross-linking
和hydrodynamic properties 的計算,我?receptors 為一tetrameric
proteins. Non-reducing SDS-PAGE和Western ynaptic junction 上的
AMPA receptors指出AMPA receptors subunits 間 且藉其連結成dimer,
trimer,and tetramaer.以detergents 自synaptic j悒XAMPA receptors
的過成會影響到AMPA receptors 的構型,增加subunits峖?而這個因溶解
過程對AMPA receptors 所產生的微擾可以在此步奏驟中蚆蚹K.雖然此雙
硫鍵構造的改變不會影響AMPA receptors 和L-glutamate銋鞝MPA
receptors channel 特性的影響則有待進一步的探討.
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