| Summary: | 碩士 === 國立清華大學 === 生命科學研究所 === 81 === Bacillus cereus為一種會分泌溶血素(hemolysin)的革蘭氏陽性產孢桿菌
。能產生三種不同的溶血素, 分別是 cereolysin,cereolysin AB和
hemolysin BL。cereolysin AB 乃是由磷脂酵素 sphingomyelinase 與
phosphatidyl- choline phospholipase 組成, 其作用機制在於水解細胞
膜上的磷脂質。Sphingomyelinase 是 Bacillus cereus所分泌的溶血素
之一,可將sphingomyelin水解成phospho- choline 及 ceramide 。溶血
素的特徵是它會破壞正常細胞的細胞膜, 高量的溶血素使細胞破裂分解;
而低量的溶血素則會影響到細胞膜正常的構造。當細胞膜被sphingo-
myelinase 擾動後,膜上的受器是否還有正常的功能,其中牽涉到蛋白質與
脂質的交互作用。本研究是先純化 Bacillus cereus 的溶血素,將 Bac
illus cereus於Tryptic soybean broth 培養 6 小時,經鹽析沉澱(
salting out),陽離子交換樹脂管柱層析法( CM Sephadex C-50),陰離子
交換樹脂管柱層析法 ( Q Sepha- rose fast flow ) , 膠體管柱層析法
( Sephadex G-100 superfine ), 高效液相層析等過程可得一分子量 36
KDa之sphingomyelinase。再以此酵素作用在人類紅血球與血小板上,來探
討 sphingomyelinase對它們的影響。結果發現: 被酵素作用的紅血球與
血小板在形態都會變成圓球型。在血小板功能上的影響則是
sphingomyelinase 會抑制 collagen 所引起的血小板凝集;並減慢
thrombin 刺激血小板反應之凝集初速, 但並不抑制凝集百分比。
Sphingo- myelinase 對 ADP+fibrinogen 刺激血小板反應之影響則有促
進凝集的作用。對於 U46619 與 epinephrine 而言, sphingomyelinase
則不影響它們刺激血小板的反應。 此外sphingomyelinase 也會抑制PGI2
所引起血小板 cAMP之增加,以及抑制collagen所引起之47 KDa蛋白之磷酸
化。
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