Genetic studies on multiple-mutagen resistance in Deinococcus radiodurans
碩士 === 國立清華大學 === 輻射生物研究所 === 79 === Deinococcus radiodurans 是Deinococcaceae菌中對DNA 傷害之抗性特性研究最多的 菌種。一株由D.radiodurans IR分離出來的短波紫外線(FUV) 敏感突變株S101被發現 同時對加瑪射線(γ-ry) ,絲裂黴素(mitomycin C;MTC) 和N-methyl-N'-nitor-N-n- itrosoguanid...
Main Authors: | , |
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Other Authors: | |
Format: | Others |
Language: | zh-TW |
Published: |
1991
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Online Access: | http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/68444175684836204182 |
Summary: | 碩士 === 國立清華大學 === 輻射生物研究所 === 79 === Deinococcus radiodurans 是Deinococcaceae菌中對DNA 傷害之抗性特性研究最多的
菌種。一株由D.radiodurans IR分離出來的短波紫外線(FUV) 敏感突變株S101被發現
同時對加瑪射線(γ-ry) ,絲裂黴素(mitomycin C;MTC) 和N-methyl-N'-nitor-N-n-
itrosoguanidine(MNNG) 這些突變劑敏感,並且也失去了野生株IR擁有的FUV 引發FU
V 抗性(FUV-induced FUV rosistance;FUV-IFUVR)。S101的這些表現形的缺失,都可
以經由自動突變的發生而得以回復。這結果暗示了在D.radiodurans IR中存在著一段
與多變劑抗性(multiple-mudiodurans resistance;MMR) 和FUV-IFUVR 相關連的基因
,並且其產物可能為一調控蛋白。
一段含有D.radiodurans IR 436 bp 的SauA DNA片段在這實驗中被分離出來,由含有
抗chloramphenicol(cm )Escherichia coli質體pBR328所攜帶( 叫pT140),當送入S1
01之後,可得到MTC 轉形株。這些MTC 形株都完整地回復了多突變劑抗性(MMR) 和FU
V-IFUVR ,但是其轉形頻率相當低( 約1.5×10 /cell)。經過限制酵素分析,發現pT
149 上的pB328 部份發生了一個突變,將這突變修正之後的pT149 ( 叫pCL13)送入S1
01也可以相同的頻率得到MTC 轉形株。當將環狀的pCL13 送入S101後所得到的Cm MTC
轉形株再經分子內重組可以10 至10 的頻率得到MTC Cm 之回復株,這些頻率比自
動突變頻率(MTC ←MTC )高出百倍以上。依據上述實驗結果,我們推測該436 bp的DN
A 片段包含著調控MMR 和FUV-IFUVR 之基因的一部份。
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