Studies on the secondary metabolites and their transforming enzymes in penicilium roqueforti

碩士 === 國立陽明大學 === 生物化學研究所 === 77 === Eremofortin C(EC) 和PR毒素是藍酪黴菌的次級化謝產物,存在培養液中。EC已被 我們證實為PR毒素的前驅物,且由EC氧化來催化,此酵素反應產生過氧化氫,利用 過氧化(peroxidase)及o-dianisidine 偶合反應,可測得此酵素的活性。 EC氧化幾乎完全存在培養液中。我們收集培養液,並以polyfiber 超過濾濃縮,再...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: LU, GING-YOU, 盧青佑
Other Authors: WEI, YAO-HUI
Format: Others
Language:zh-TW
Published: 1988
Online Access:http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/87756628965517416364
Description
Summary:碩士 === 國立陽明大學 === 生物化學研究所 === 77 === Eremofortin C(EC) 和PR毒素是藍酪黴菌的次級化謝產物,存在培養液中。EC已被 我們證實為PR毒素的前驅物,且由EC氧化來催化,此酵素反應產生過氧化氫,利用 過氧化(peroxidase)及o-dianisidine 偶合反應,可測得此酵素的活性。 EC氧化幾乎完全存在培養液中。我們收集培養液,並以polyfiber 超過濾濃縮,再 以85%硫酸銨鹽析。沈澱出來的EC氧化分別以Fractogel HW 50 及高效能液態層 析管柱SW 300等分子篩層析後,再以SDS-polyacrylamide膠體電泳再純化,以活性染 色,找出具活性的蛋白質帶,切下後以電泳流洗器將EC氧化流洗出來。最終產物的 純度增加21倍,比活性高達292unla/mg蛋白質。 EC氧化分子量為62,000 dalton 。它是醣蛋白,醣鏈佔整個蛋白質重量的6%。最 適PH值為5.6。在各種不同的PH值中極為穩定。最適反應溫度為50℃。對於溫度 相當穩定,但超過60℃後則急劇失活。此氧化對EC的Km值為8.2μM,而且有非常 高的基質特異性。 藍略黴菌適合生長在24℃左右的溫度下,高於或低於24℃均不利其生長。添加玉 米煮出液10克、30克、90克,使EC產量分別增加5.1,6.2和6.7倍, 而PR毒素分別增加為3.3,4.6和4.9倍。在生長的第0、2、4、6、8天 添加玉米煮出液,我們發現EC毒素產量分別增加為4.6,3.7,2.8和2.2 倍。這結果顯示越早添加玉米煮出液,對其EC及PR毒素產量的增加越顯著。並EC氧化 的活性也隨著玉米煮出液添加入培養液的濃度增加而增加。