Étude de l'expression génique dans les cellules de la granulosa bovine durant la période pré-ovulatoire

• Main Author: Gilbert, Isabelle
• Other Authors: Blondin, Patrick
• Format: Doctoral Thesis
• Language: French
• Published: Université Laval 2011
• Subjects: S 405 UL 2011 G464; Granulosa > Aspect génétique; Hormone lutéinisante; Bovins > Endocrinologie
• Online Access: http://hdl.handle.net/20.500.11794/23097

Dans cette étude, nous nous sommes principalement intéressés aux changements transcriptionnels des cellules de la granulosa (CG) durant la période pré-ovulatoire afin de mieux caractériser le rôle du pic de LH avant l'ovulation. Nous avons trouvé qu'avant le pic de LH, les CG exercent principalement des fonctions de division et de prolifération cellulaire, après le pic de LH, les CG sont impliquées dans la vascularisation et la synthèse de lipides, tandis que la réponse plus tardive suite au pic de LH, montrent des fonctions de localisation et de transport protéique. Ensuite, dans une optique plus appliquée à l'industrie bovine, nous avons investigué la présence de marqueurs moléculaires dans les CG associés à la compétence au développement embryonnaire de 1'ovocyte. Nous avons identifiés 18 transcrits sur-exprimés dans les CG associés aux ovocytes compétents. Plusieurs de ces marqueurs sont associés à la chromatine, au cycle cellulaire et à la stabilité de l'ADN. De plus, parmi les marqueurs trouvés, certaines séquences, malgré leur alignement sur le génome bovin, ne correspondent à aucun gène connu. Deux de ces nouvelles régions transcrites (NTR) se retrouvent près du gène de l'INHBA et pourraient constituer soit un variant d'épissage, soit un élément de régulation en 3'UTR. Les différents marqueurs trouvés dans les CG constituent un moyen non-invasif qui permettra de discriminer quels ovocytes ont le plus de potentiel à former un embryon sans que le gamète lui-même soit utilisé. Finalement, puisqu'il existe sur le marché plusieurs méthodes pour effectuer l'hybridation des biopuces, les cinq principales étapes de la préparation des échantillons et la validation post-hybridation par qRT-PCR ont été évalués. Dans l'ensemble, ces études ont permis de mettre en lumière les différentes étapes transcriptionnelles que les CG doivent compléter avant l'ovulation ainsi que quelques transcrits associés au statut de compétence de 1'ovocyte. Ultimement, une meilleure connaissance de la signature transcriptionnelle des CG à différentes étapes de la folliculogenèse permettra d'améliorer la stimulation ovarienne et la production embryonnaire subséquente.