Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques

Le RadLV/VL₃ clone V-13 est un rétrovirus murin thymotrope, non défectif, fortement leucémogène et écotrope. Il induit des lymphomes des cellules T en s'intégrant dans le génome de l'hôte. Le virus peut causer une tumeur en modifiant le fonctionnement des gènes près desquels il s'est...

Full description

Bibliographic Details
Main Author: Banski, Piotr
Format: Others
Published: 2006
Subjects:
Online Access:http://www.archipel.uqam.ca/2123/1/M9176.pdf
id ndltd-LACETR-oai-collectionscanada.gc.ca-QMUQ.2123
record_format oai_dc
spelling ndltd-LACETR-oai-collectionscanada.gc.ca-QMUQ.21232013-10-04T04:02:58Z Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques Banski, Piotr Rétrovirus Amplification en chaîne par polymérase Mutagénèse insertionnelle Leucémie murine Le RadLV/VL₃ clone V-13 est un rétrovirus murin thymotrope, non défectif, fortement leucémogène et écotrope. Il induit des lymphomes des cellules T en s'intégrant dans le génome de l'hôte. Le virus peut causer une tumeur en modifiant le fonctionnement des gènes près desquels il s'est intégré. Ces intégrations, si retrouvées au même endroit dans plus d'une tumeur, définissent un site commun d'intégration. Ce projet a pour but de trouver un ou des nouveaux sites d'intégration du rétrovirus RadLV/VL₃ clone V-13. Pour ce faire, un oligonucléotide de séquence connue, nommé splinkerette, a été utilisé. L'ADN d'une souris tumorale est coupée puis une splinkerette y est ligasée. Ceci permet d'amplifier, par des réactions de PCR, les régions flanquantes aux intégrations rétrovirales. Une fois clonées, les produits des PCR sont séquencés, permettant de situer les intégrations dans le génome de la souris, qui est disponible dans les banques de données. Il est ainsi possible de repérer les gènes à proximité de l'intégration rétrovirale. Certains gènes d'intérêt ont déjà été retrouvés grâce à cette technique pour d'autres rétrovirus. Dans le cas du RadLV/VL₃, parmi une vingtaine de tumeurs et environ 70 bandes analysées, les gènes Notch l, Rasgrp1, Rorc, Lef1, Gfi1, Ncor2, Scarb1, Lfng, Mad, Myb, Ahi1, Supt4h, Bzrap1, Sept9, Fos, Jundm2, Myc, Pim1, Ccnd3, Bcl211 et Gpc3 ont été trouvés. Plusieurs de ces oncogènes n'ont jamais été associés au rétrovirus RadLV/VL₃. Deux régions potentiellement oncogéniques sur les chromosomes 7 et 11 ont été identifiées. La compréhension du fonctionnement des oncogènes permettra d'empêcher leur expression aberrante, ou d'utiliser des rétrovirus comme vecteurs dans la thérapie génique afin de corriger l'expression de gènes mutés. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : ADN, Clonage, Leucémie, Oncogène, PCR, RadLV/VL₃, Rétrovirus, Séquençage, Site commun d'intégration, Sonde radioactive, Splinkerette, Tumeur. 2006 Mémoire accepté NonPeerReviewed application/pdf http://www.archipel.uqam.ca/2123/1/M9176.pdf Banski, Piotr (2006). « Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques » Mémoire. Montréal (Québec, Canada), Université du Québec à Montréal, Maîtrise en biologie. http://www.archipel.uqam.ca/2123/
collection NDLTD
format Others
sources NDLTD
topic Rétrovirus
Amplification en chaîne par polymérase
Mutagénèse insertionnelle
Leucémie murine
spellingShingle Rétrovirus
Amplification en chaîne par polymérase
Mutagénèse insertionnelle
Leucémie murine
Banski, Piotr
Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques
description Le RadLV/VL₃ clone V-13 est un rétrovirus murin thymotrope, non défectif, fortement leucémogène et écotrope. Il induit des lymphomes des cellules T en s'intégrant dans le génome de l'hôte. Le virus peut causer une tumeur en modifiant le fonctionnement des gènes près desquels il s'est intégré. Ces intégrations, si retrouvées au même endroit dans plus d'une tumeur, définissent un site commun d'intégration. Ce projet a pour but de trouver un ou des nouveaux sites d'intégration du rétrovirus RadLV/VL₃ clone V-13. Pour ce faire, un oligonucléotide de séquence connue, nommé splinkerette, a été utilisé. L'ADN d'une souris tumorale est coupée puis une splinkerette y est ligasée. Ceci permet d'amplifier, par des réactions de PCR, les régions flanquantes aux intégrations rétrovirales. Une fois clonées, les produits des PCR sont séquencés, permettant de situer les intégrations dans le génome de la souris, qui est disponible dans les banques de données. Il est ainsi possible de repérer les gènes à proximité de l'intégration rétrovirale. Certains gènes d'intérêt ont déjà été retrouvés grâce à cette technique pour d'autres rétrovirus. Dans le cas du RadLV/VL₃, parmi une vingtaine de tumeurs et environ 70 bandes analysées, les gènes Notch l, Rasgrp1, Rorc, Lef1, Gfi1, Ncor2, Scarb1, Lfng, Mad, Myb, Ahi1, Supt4h, Bzrap1, Sept9, Fos, Jundm2, Myc, Pim1, Ccnd3, Bcl211 et Gpc3 ont été trouvés. Plusieurs de ces oncogènes n'ont jamais été associés au rétrovirus RadLV/VL₃. Deux régions potentiellement oncogéniques sur les chromosomes 7 et 11 ont été identifiées. La compréhension du fonctionnement des oncogènes permettra d'empêcher leur expression aberrante, ou d'utiliser des rétrovirus comme vecteurs dans la thérapie génique afin de corriger l'expression de gènes mutés. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : ADN, Clonage, Leucémie, Oncogène, PCR, RadLV/VL₃, Rétrovirus, Séquençage, Site commun d'intégration, Sonde radioactive, Splinkerette, Tumeur.
author Banski, Piotr
author_facet Banski, Piotr
author_sort Banski, Piotr
title Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques
title_short Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques
title_full Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques
title_fullStr Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques
title_full_unstemmed Identification de sites communs d'intégration du rétrovirus RADLV/VL3 dans le génome de souris leucémiques
title_sort identification de sites communs d'intégration du rétrovirus radlv/vl3 dans le génome de souris leucémiques
publishDate 2006
url http://www.archipel.uqam.ca/2123/1/M9176.pdf
work_keys_str_mv AT banskipiotr identificationdesitescommunsdintegrationduretrovirusradlvvl3danslegenomedesourisleucemiques
_version_ 1716598392464867328