Molecular characterization of Pannexin-1 and Pannexin-3 in the male reproductive tract of adult rat

• Main Author: Turmel, Patrick
• Other Authors: Daniel G Cyr (Internal/Supervisor)
• Format: Others
• Language: en
• Published: McGill University 2010
• Subjects: Biology - Anatomy
• Online Access: http://digitool.Library.McGill.CA:80/R/?func=dbin-jump-full&object_id=86747

Recently, a novel family of gap junction (GJ) proteins, the pannexins (Panxs), has been identified in vertebrates. To evaluate the role of Panxs in the male reproductive tract (MRT), we investigated the expression and distribution of Panx1 and Panx3 in the testis, efferent ducts (EDs), and epididymis of adult rats. In the testis, Panx1 localized to Sertoli cells in the basal compartment of seminiferous epithelium, while Panx3 was expressed in Leydig cells. In the EDs, both Panx1 and Panx3 were expressed in the epithelium, notably at the apical region of ciliated cells. In the epididymis, both Panxs were expressed in principal cells. Prominent labelling for Panx1 was also observed laterally and basally between adjacent principal cells and at the interface between principal and basal cells. Panx3 was noted apically in principal cells and at the plasma membrane of halo cells. RT-PCR and Western blots analyses confirmed the expression of both Panxs in the MRT, with multiple species being detected in western blots and observed to be expressed in a region-specific manner, corroborating previous reports of post-translational glycosylation of Panxs. Preliminary RT-PCR results suggested that Panx1 may be regulated at the mRNA level since alternative splicing may account for some of these species. Testosterone and other testicular factors appear to regulate expression of Panxs, as an increase in the number of Panx1 species and a change in the expression of Panx3 species were observed with orchidectomy, and these were partially inhibited by testosterone supplementation. In conclusion, Panxs are present throughout the MRT where they are expressed in a cell type- and region- specific manner and appear to be regulated in terms of expression levels, subcellular localization and post-translational modification. Taken together their wide spread distribution suggest an important role for Panxs in the MRT. === Une nouvelle famille de protéine de jonctions lacunaires, les pannexines (Panxs), a récemment été découverte chez plusieurs espèces, incluant chez les vertébrés. Pour évaluer le rôle des Panxs dans le système reproductif mâle (SRM), l'expression et la distribution de Panx1 et Panx3 ont été étudiées dans le testicule, les canaux efférents et l'épididyme de rats adultes. Dans le testicule, Panx1 était présente dans les cellules de Sertoli, dans la région basale des canaux séminifères, tandis que Panx3 était exprimée par les cellules de Leydig. Dans les canaux efférents, les deux Panxs étaient exprimées dans l'épithélium, principalement dans la région apicale des cellules ciliées. Finalement, dans l'épididyme, Panx1 et Panx3 étaient localisées dans les cellules principales. Panx1 se retrouvait dans la région latérale et basale entre les cellules principales adjacentes en plus d'être présente à l'interface entre les cellules principales et basales. Panx3 était présente dans la région apicale des cellules principales et à la membrane plasmique des cellules halo. Les analyses de RT-PCR et d'immunobuvardage de type Western ont confirmé la présence des deux Panxs dans le SRM. Ces analyses ont mis en évidence plusieurs bandes spécifiques pour chaque Panxs dans les différentes régions, ce qui corrobore avec de récentes évidences démontrant la glycosylation post-traductionnelle des Panxs. Des résultats préliminaires de RT-PCR démontrant un épissage alternatif de Panx1 suggère aussi une régulation au niveau de l'ARNm et certaines des bandes obtenues en immunobuvardage pourraient être dues à ce processus. La testostérone et d'autres facteurs testiculaires semblent jouer un rôle dans la régulation des Panxs, car une augmentation du nombre de bandes pour Panx1 et un changement dans l'expression des bandes pour Panx3 au niveau de la protéine ont été observés suite à la castration des animaux, et ces changement