The inheritance of loss: Caspase-6 activity and effect in human neurons caused by familial Alzheimer's Disease associated mutants

• Main Author: Sivananthan, Saskia
• Other Authors: Andrea LeBlanc (Supervisor)
• Format: Others
• Language: en
• Published: McGill University 2009
• Subjects: Biology - Neuroscience
• Online Access: http://digitool.Library.McGill.CA:80/R/?func=dbin-jump-full&object_id=32417

Active Caspase 6 associates with the neuropathological hallmarks of sporadic Alzheimer disease (SAD), indirectly increases amyloid beta (A-Beta) and cleaves Tau and other cytoskeleton proteins. Given the similar neuropathology of SAD and familial AD (FAD), my objective is to assess if FAD-associated amyloid precursor protein (APP) mutations activate Caspase 6 in human neurons. Human neurons were transfected with a bigenic vector expressing enhanced green florescent protein (EGFP) and either wild type APP, the Swedish or London mutations. Normally diffuse EGFP beads in neurons over-expressing APP or APP mutants in an A-Beta independent manner and appears to co-localize with beaded Tau and Ubiquitin. Additionally, the number of EGFP-positive APP or APP mutant-transfected neurons decreases with time in culture and undergoes A-Beta dependent cell death. Treatment with a caspase 6 inhibitor or dominant negative Caspase 6 attenuates EGFP beading, EGFP-positive neuronal dropout and cell death. Therefore, FAD-mutants and APP over-expression activate Caspase 6 in human neurons resulting in morphological changes and A-Beta dependent cell death that may contribute to the neuropathological features of FAD. === La forme active de la Caspase 6 est impliquée dans les effets neuropathologiques typiques de la forme sporadique de la maladie d'Alzheimer (SAD) en augmentant indirectement la production du peptide amyloïde-bêta (A-Beta) et en clivant Tau ainsi que d'autres protéines du cyotoskelette. Compte tenu des neuropathologies similaires de SAD et de la forme familiale de la maladie d'Alzheimer (FAD), mon objectif était de déterminer si les mutations de la protéine précurseur de l'amyloïde (APP) associées à FAD, activent la Caspase 6 dans les neurones humains. Les neurones humains ont été transfectés avec un vecteur bigénique exprimant la protéine fluorescente verte (EGFP; Enhanced Green Fluorescent Protein) et soit l'APP sauvage ou sa forme mutée associée a FAD soit la mutation Suédoise ou la mutation de Londre. Normalement présente sous forme diffuse dan le neurone, l'EGFP forme des agrégats dan les neurites del cellules qui sur experiment en présence de l'APP sauvage ou les mutants. La protein Tau et d'Ubiquitine semble se co-localiser avec les agrégations EGFP. Notons que cette accumulation ne dépend pas de la présence de A-Beta. De plus, le nombre de neurones exprimant une forme ou l'autre d'APP où EGFP est visible diminue et il y a augmentation de la mort cellulaire chez ces cellules liée à la présence de A-Beta. Le traitement avec l'inhibiteur de la Caspase 6 ou un mutant dominant négatif de la Caspase 6 atténue la formation d'agrégats d'EGFP, la diminution du nombre de neurones positifs à l'EGFP et la mort cellulaire. Par conséquent, les mutants FAD activent la caspase 6 dans les neurones humains et mènent à des changements de morpholo