The expression of Saccharomyces cerevisiae K2 preprotoxin gene in plant Nicotiana tabacum L. and the search of toxins producing microorganisms and analysis of their use

• Main Author: Čapukoitienė, Brigita
• Other Authors: Jurkonienė, Sigita
• Format: Doctoral Thesis
• Language: English
• Published: Lithuanian Academic Libraries Network (LABT) 2011
• Subjects: Biology; Bacteria; Killer system; Toxin; Yeast; Bakterijos; Kilerinė sistema; Toksinai; Mielės
• Online Access: http://vddb.laba.lt/fedora/get/LT-eLABa-0001:E.02~2011~D_20110607_092650-99360/DS.005.1.01.ETD

Out of fruits and berries there was analyzed and prepared around 230 spontaneous fermentations. Out of them was extracted 17 strains, characterised with activated biocidic, evaluated it´s immune and fungicidal properties, comparing it with yeast S. cerevisiae sensitive and killer strains. The temperatures and pH for the best killer toxin secretion of killer yeast strains and bacterial isolates were defined. It shows that toxins of the isolates can be used against plants, animals and humans pathogenic microorganisms: Candida spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Penicillium spp., Verticillium spp., Venturia spp. 1M yeast strain was found, which had features, necessary for wine yeast and fermentated apple juice quality parameters and was used for natural apple wine semimanufactures production in cooperative company „Vaisių sultys“. During this research it was the first time when the K2 killer preprotoxin gene was cloned successfully to plant Nicotiana tabacum L. and analysed its expression. === Iš vaisių – uogų buvo paruošta ir išanalizuota apie 230 spontaninių raugų. Iš jų išskirta 17 kamienų, pasižyminčių biocidiniu aktyvumu, įvertintos jų imuninės ir fungicidinės savybės, lyginant juos su mielių S. cerevisiae jautriais ir kileriniais kamienais. Parodyta, kad izoliatų toksinai gali būti panaudoti kovai su patogeniniais mikroorganizmais. Nustatytos išskirtų kilerinių mielių ir bakterijų izoliatų sekretuojamų toksinų geriausios raiškos temperatūros ir pH sąlygos. Nustatytas rastų bakterinių izoliatų poveikis augalų, gyvūnų bei žmonių patogenams: Candida spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Penicillium spp., Verticillium spp., Venturia spp. Aptiktas naujas mielių S. cerevisiae kilerinis kamienas, kuris pasižymėjo savybėmis, reikalingomis pramoninėms vynų mielėms ir fermentuotų obuolių sulčių kokybės parametrams, ir buvo panaudotas obuolių vyno natūralaus pusgaminio gamyboje kooperatinėje bendrovėje „Vaisių sultys“. Atlikus transformuoto augalo Nicotiana tabacum L., nešančio mielių S. cerevisiae K2 kilerinio preprotoksino geno vektorius, molekulinę analizę, parodytas kilerinio geno buvimas. Įvertinta K2 kilerinio preprotoksino geno, reguliuojamo CaMV promotoriumi, raiška mielėse.