Mecanismos envolvidos na citotoxicidade de uma ditiolpirrolona obtida de Streptomyces sp. isolado da AscÃdia Eudistoma vannamei

• Main Author: Paula AraÃjo de Abreu
• Other Authors: LetÃcia Veras Costa-Lotufo
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal do Cearà 2013
• Subjects: Ditiolpirrolona; CÃlulas PC-3M; Dithiolopyrrolone; cytotoxic; PC-3M cells; Streptomyces sp; FARMACOLOGIA
• Online Access: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=9700

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico === O cÃncer à caracterizado por ser um conjunto de doenÃas que envolve crescimento descontrolado, surgimento e espalhamento de cÃlulas anormais, e à considerada uma das principais causa de morte por doenÃa no mundo. AscÃdias e microorganismos marinhos sÃo profÃcuos produtores de substÃncias com atividade citotÃxica e antitumoral. Estudos preliminares com a ascÃdia Eudistoma vannamei, endÃmica do nordeste brasileiro, identificaram uma potente atividade anticÃncer de seu extrato e, a partir dele, isolaram-se esteuroporinas inÃditas. Curiosamente, tais molÃculas sÃo comumente produzidas por bactÃrias. No presente trabalho, os extratos dos microorganismos isolados da ascÃdia foram testados quanto a sua citotoxicidade e o mais potente deles foi selecionado e indentificado como actinomiceto pertencente ao gÃnero Streptomyces sp. A partir da purificaÃÃo desse extrato, foi isolada uma ditiolpirrolona citotÃxica que apresentou valores de concentraÃÃo inibitÃria mÃdia variando de 1,05 a 6,39 μM, em diferentes linhagens tumorais. Estudos realizados em cÃlulas de carcinoma prostÃtico humano metastÃtico indicaram que a ditiolpirrolona causou despolarizaÃÃo mitocondrial e induziu o aparecimento de figuras mitÃticas, apÃs 24 e 48 horas de tratamento. AlÃm disso, detectou-se alteraÃÃo no ciclo celular, como atraso nas fases final do ciclo, S e G2/M. A ditiolpirrolona alterou a expressÃo de algumas proteinas relacionadas ao ciclo celular e principalmente à citocinese, como Prc1, Plk-1 e RhoA, tais proteÃnas estÃo diretamente envolvidas com a formaÃÃo do anel contrÃtil, imprescindÃvel para a conclusÃo da divisÃo celular === Ascidians and marine microorganisms are prolific producers of cytotoxic and antitumor compounds. As part of a study to examine Brazilian species, we examined microbiota associated with ascidian, Eudistoma vannamei as potential sources for active natural product leads Earlier revisions with this specie showed a potent anticanceractivity of its extract; and two unpublished staurosporines were isolated. Curiously, these classes of compounds are generally produced by bacteria. So, in order to evaluate the biomedical potential of these compounds the microbiota associated to the ascidian Eudistoma vannamei was investigated. From this effort we isolated a number of bacterial strains and after screening for cytotoxicity using a panel of tumor cell lines, we identified a Streptomyces sp.,that presented significant bioactivity. Using bioactivity fractionation, we identified the active compound as, dithiolopyrrolone N-(4,5-dihydro-5-oxo-1,2- dithiolo[4,3-b]pyrrol-6-yl)-N-methyl-formamide also know as VD846. The compound presented IC50 values ranging from 1.1 to 6.4 μM across a panel of cell lines. Further biological studies, indicated that this compound induced cell cycle arrest during mitosis, an observation that was confirmed by evaluating the effects on a series of cell lines using mitotic index analyses, flow cytometry, and confocal microscope. Western blot analyses indicated that cells treated with VD846 resulted in reduced expression of Plk1 and RhoA, proteins that are necessary for cleavage furrow assembly and exit from cytokinesis.