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Previous issue date: 2012-02-28 === Banco Santander / Banespa === Micro-organismos queratinolíticos são encontrados em diversos ambientes, já havendo sido descritos diversos fungos e bactérias. Entre as enzimas microbianas que vem ganhando destaque estão as queratinases, responsáveis pela degradação da queratina. O objetivo desse trabalho foi isolar e identificar micro-organismos produtores de queratinases a partir de penas em decomposição provenientes de pinguins (Pygoscelis antarctica e Pygoscelis papua) da Ilha Rei George, Antártica. O cultivo dos micro-organismos foi realizado em placas de ágar farinha de pena (AFP) a temperatura ambiente (± 25 e 8 ºC) e posteriormente, foram armazenadas na geladeira (8 ºC). Os micro-organismos selecionados foram identificados a partir de análises moleculares, através da obtenção da sequência do gene 16S do rDNA. Para avaliação inicial do potencial proteolítico, os isolados foram inoculados no meio Ágar leite (AL) e incubados por 7 dias nas temperaturas de 8 ºC, por uma semana, a 25 ºC e 37 ºC, por até 48 horas, sob os pHs 5,0, 7,0, 9,0 e 11,0. Aqueles capazes de formar halos em AL formam selecionados para os testes enzimáticos sob o substrato de caldo farinha de pena (CFP). Para a determinação da atividade queratinolítica foi utilizado o substrato azoqueratina. O isolado identificado através do gene 16S como Lysobacter sp. foi capaz de crescer no meio AFP como única fonte de carbono e nitrogênio e apresentou também a formação de halos em AL e, produzindo queratinases quando inoculado no meio CFP e incubado 8 ºC e 20 °C, pH 7,0. Este é um dos primeiros trabalhos a confirmar a existência de bactérias produtoras de proteases queratinoliticas no Ambiente Antártico, as quais mostram-se ativas nas faixas de temperaturas abaixo de 25 ºC. === Keratinolitic micro-organisms are found in diverse environments, having already been described between fungi and bacteria. Among the microbial enzymes that have been gaining prominence are the keratinases, responsible for the keratin degradation. The aim of this study is to isolate and to identify micro-organisms producing keratinases from decomposing feathers of penguins (Pygoscelis antarctica and Pygoscelis papua) from King George Island, Antarctica. The cultivation of micro-organisms was performed on Ágar feather meal plates at room temperature (± 25 °C and 8 ºC) and, afterwards, they were stored in the refrigerator (8 °C). The selected micro-organisms were identified through molecular analysis, by obtaining the sequence of the gene 16S from rDNA. For an initial assessment of the proteolytic potential, the isolates were inoculated on milk-agar (MA) and incubated for 7days at 8 °C for one week, at 25 °C and 37 °C for up to 48 hours, on pHs 5,0,7,0, 9,0 and 11,0. Those able to form halos on MA were selected for enzyme tests on feather meal broth substrate. For keratinolitic determination azokeratin substrate was used. The isolate identified through gene 16S as Lysobacter sp. was capable of growing on agar feather meal as the sole carbon and nitrogen source, and it showed the formation of halos on MA, and produced keratinase when inoculated on feather meal broth substrate and incubated at 8 °C and 20 °C, pH 7.0. This is one of the first studies to confirm the existence of keratinolitic protease producing bacteria in the Antarctic environment, which are active in temperatures below 25 °C.
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