Busca de substâncias antitumorais e tripanosomicidas: estudo químico de Lentinus strigosus (Basidiomycota) e Habenaria petalodes (Orquidaceae)

• Main Author: Cota, Betania Barros
• Other Authors: Zani, Carlos Leomar
• Language: Portuguese
• Published: 2013
• Subjects: Química/Métodos; Produtos Naturais; Basidiomicetos
• Online Access: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/6270

Submitted by Nuzia Santos ([e-mail]) on 2013-01-25T16:45:19Z No. of bitstreams: 1 Betania_Barros_Cota.pdf: 18306356 bytes, checksum: deed89dbf117b1a6d715965faf6591af (MD5) === Made available in DSpace on 2013-01-25T16:45:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Betania_Barros_Cota.pdf: 18306356 bytes, checksum: deed89dbf117b1a6d715965faf6591af (MD5) Previous issue date: 2007 === As espécies estudadas neste trabalho foram selecionadas a partir de um estudo de triagem intitulado “Bioprospecção da Biodiversidade Mineira e Desenvolvimento de Novas Drogas em Minas Gerais”, em que extratos de espécies vegetais e fungos basidiomicetos, coletados em ecossistemas locais, foram submetidos a diversos ensaios biológicos. O extrato acetato em etila do meio líquido do fungo Lentinus strigosus inibiu a enzima tripanotiona redutase (TR) de Trypanosoma cruzi e seu fracionamento biomonitorado levou ao isolamento de quatro substâncias; neopanepoxidol, 6,7-epóxi-4(15)-hirsuteno-1,5-diol, hipnofilina e panepoxidona, sendo as duas últimas responsáveis pelas atividades biológicas do extrato. Esses dois metabólitos terpênicos apresentaram atividade citotóxica para três linhagens tumorais humanas (UACC-62 -melanoma; TK-10 - renal e MCF-7 - mama; CI de 3,2 μM a 11,0 μM), inibiram a proliferação de linfócitos induzidos por. fitohemaglutinina (CI de 5,9 μM e 10,0 μM), a enzima TR (CI de 48,5 μM a 1,0 μM) e o crescimento de formas amastigotas de T. cruzi (CI de 6,0 μM e 2,5 μM). Panepoxidona e hipnofilina já foram descritas anteriormente, porém, é a primeira vez que se relata o isolamento desses metabólitos em L. strigosus. O extrato bruto etanólico de Habenaria petalodes (Orquidaceae) apresentou atividade citotóxica para três linhagens tumorais humanas a 20 μg/ mL (UACC-62 - melanoma; TK-10 -renal e MCF-7 - mama). O extrato etanólico bruto de toda a planta foi extraído com diclorometano (fração apolar) e metanol/água (fração polar) por extração líquidolíquido. A fração diclorometânica apresentou actividade citotóxica para as três linhagens de células tumorais a 20 μg/ mL e foi selecionada para posterior fracionamento biomonitorado devido a sua baixa massa e complexidade química. Devido à ausência de relatos sobre os constituintes químicos, as frações polares de Habenaria petalodes (Orquidaceae) foram priorizadas para estudo fitoquímico. A fração polar foi extraída em cartucho Sep-Pak C e forneceu as subfrações, metanólica e aquosa que foram fracionadas por técnicas cromatográficas, obtendose três derivados do ácido succínico; loroglossina, militarina e dactilorina acetilada no anel 2 e, três flavonóides: isoquercitrina, isoramnetina 3-O-β-glicopiranosídeo e 50 50 50 50. 18 isoramnetina 3,7-di-O-β-glicopiranosídeo, isolados pela primeira vez nesta espécie vegetal (AU === In a previous screening work many vegetal species and basidiomycete fungi were collected on local ecosystems and tested in several bioassays. From this work we selected to study the Lentinus strigosus fungus and Habenaria petalodes orchid. The ethyl acetate extract from the culture of fungus inhibited the enzyme trypanothione reductase (TRYR) from Trypanosoma cruzi. The chromatographic fractionation guided by inhibition of trypanothione reductase assay of L. strigosus extract furnished four compounds, neopanepoxidol, 6,7-epoxi-4(15)-hirsutene-1,5-diol, hypnophilin and panepoxidone, reported from this fungus species for the first time. Panepoxidone and hypnophilin, the bioactive compounds of the extract, showed a cytotoxic activity on human tumour cell lines (IC 3.2 to 11.0 μm), inhibited the lymphocyte proliferation (IC 5.9 and 10.0 μm), the TRYR enzyme (IC 48.5 to 1.0 μm) and the growth of amastigotes of T. cruzi (IC de 6.0 and 2.5 μm). The ethanolic crude extract of Habenaria petalodes (Orchidaceae) showed cytotoxic activity in three human tumour cell lines, at 20 μg.ml (UACC-62 - melanome; TK-10 - kidney e MCF-7 - breast). The ethanolic crude extract of whole plant was extracted with dichlorometane (apolar fraction) and methanol/water (polar fraction) by liquid-liquid extraction. The apolar fraction showed cytotoxic activity in the three human tumour cell lines, at 20 μg.ml and was selected for further guided fractionation because low mass and complexity of this fraction. The chemical investigations of polar fractions of H. petalodes was performed because there is no previous studies of this plant. The polar fraction was subjected to Sep-Pak C cartridge to give two polar subfrations, the methanolic and aqueous. These subfractions were purified by chromatographic techniques furnishing three succinic acid derivatives, loroglossine, militarine and dactilorine acylated in the ring 2, and three flavonoids: isoquercitrine, isoramnetin 3-O-β-glycopyranoside and isoramnetin 3,7-di-O-β-glycopyranoside, related in this species from the first time.