| Summary: | Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-10-09T18:04:23Z
No. of bitstreams: 1
andre_b_veloso_ioc_bp_0047_2011.pdf: 4592043 bytes, checksum: a2b54a8751c7c9a32fe93ed74e1392a6 (MD5) === Made available in DSpace on 2012-10-09T18:04:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1
andre_b_veloso_ioc_bp_0047_2011.pdf: 4592043 bytes, checksum: a2b54a8751c7c9a32fe93ed74e1392a6 (MD5)
Previous issue date: 2011 === FAPERJ === Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. === No presente trabalho, as atividades proteolíticas de extratos totais das fases pré-imaginais
(ovos, larvas e pupa) e de imagos (machos e fêmeas), de Cx. quinquefasciatus foram
caracterizadas por enzimografia em uma dimensão. Adicionalmente, o perfil proteolítico dos
órgãos internos dos adultos (intestino e gônadas) foi analisado. Ao se comparar o perfil
proteolítico das distintas fases evolutivas, observou-se que esses perfis apresentam diferenças
qualitativas e quantitativas na expressão de peptidases. As atividades proteolíticas de todos os
estágios do inseto são devidas, principalmente, a serinopeptidases do tipo tripsina, com
atividades ótimas na faixa de pH alcalino. As tripsinas ativas dos quatro estádios larvais
apresentam ampla estabilidade térmica, sendo ativas entre 25 °C – 65 °C, com atividade ótima
entre 37 °C – 50 °C.. O perfil proteolítico dos imagos revelou que a expressão de algumas
peptidases do tipo tripsina é sexo-específica e órgão-específica, sendo o perfil proteolítico das
fêmeas mais complexo em número e intensidade quando ao perfil dos machos. Finalmente, o
primeiro mapa proteômico parcial do intestino de fêmeas de Cx. quinquefasciatus foi obtido
por eletroforese bidimensional e as proteínas foram identificadas por espectrometria de
massas. === In this work, the proteolytic activities from total extracts of pre-imaginal stages (eggs, larvae
and pupa) and adults (male and female) of peptidases of Cx. quinquefasciatus were
characterized by one-dimensional zymography. In addition, the proteolytic profile from
specific tissues such as gut and gonads was analyzed. Comparison of the proteolytic profiles
from all life cycle stages revealed several quali- and quantitative differences in the peptidase
expression. The proteolytic activities from both pre-imaginal and imaginal stages are mostly
due to trypsin-like serine peptidases which display optimal activities at alkaline pH. The
proteolytic enzymes of the four larval stages exhibited a broad thermal stability, showing
activities in a range of 25 °C – 65 °C, with optimal activity between 37 °C – 50 °C. The
proteolytic profile from imaginal stages revealed that the expression of some peptidase
isoforms is sex-specific and tissue-specific. In addition, it was observed that the proteolytic
profile from females is more complex, both in number of activities and in intensity levels,
than that observed in males. Finally, it is reported here the first proteomic map of Cx.
quinquefasciatus female gut obtained by two-dimensional electrophoresis and mass
spectrometry analysis.
|
|---|
