| Summary: | A proteína p53é freqüentemente relacionada às neoplasias humanas e animais, estando
indiretamente relacionada com o bloqueio do ciclo celular, angiogênese e indução à
apoptose. O objetivo deste trabalho foi analisar a presença de alterações no gene TP53,
assim como a expressão dos genes relacionados ao câncer em neoplasias caninas.Tumores
caninos (n=50) foram avaliados através de análise histopatológica, perfis de SSCP dos
exons 5, 6 e 7 e seqüenciamento da região intron5-exon7. Parte destes tumores (45
amostras) foram analisados quanto à expressão dos genes TP53, p21, MDM2, Bax, Bcl2,
IGF-BP3, VEGF e bFGF através de qRT-PCR. Os resultados mostraram que as neoplasias
mamárias, particularmente túbulo-papilares complexas, são as mais comuns em cães. A
ocorrência de neoplasias em cães está relacionada com a idade e a raça. Alta prevalência de
alterações nos perfis de SSCP foi constatada em tumores caninos. Entretanto, esta técnica,
preconizada como eficiente por diversos autores apresenta análise e interpretação
complexa e subjetiva, não apresentando relação com os dados de seqüenciamento no
presente trabalho. Parte dos tumores (42%) apresentaram alterações nos exons 6 e/ou 7 do
gene TP53, e apesar de se encontrarem em heterozigose, podem comprometer
funcionalmente a proteína p53. A única alteração em homozigose foi detectada num
osteossarcoma de mama e correspondeu a uma transição GA no códon 270 (arghis)
conhecido como hotspot situado no domínio de ligação da proteína p53 ao DNA. As
alterações observadas nas sequências nos introns 5 e 6 do gene TP53 não se encontram em
sítios envolvidos no processamento do RNA. Ampla variação na expressão relativa dos
genes TP53, Bax, p21, MDM2, Bcl2, IGF-BP3 e bFGF foi constatada em tumores
mamários e de pele. Entretanto, não foi possível estabelecer relações entre expressão e
alterações no gene TP53, ou entre a expressão dos genes em estudo entre si. O gene IGFBP3foi
hiper ou hipo expresso em 60% dos tumores de pele, mas não apresentou alteração
em tumores de mama. Por outro lado, 82,9% dos tumores mamários apresentaram hiper
expressão do gene Bax, enquanto não foi observada alteração na expressão deste gene em
tumores de pele. Apesar de serem considerados indicadores de prognóstico, de um modo
geral não foi constatada correlação entre o nível de expressão dos genes TP53, Bax, p21,
MDM2, Bcl2, IGF-BP3e bFGF e o grau histopatológico. === Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-07-17T16:49:03Z
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Dissertacao Guilherme Thomazi.pdf: 2020976 bytes, checksum: 98e8bd3f32246c587da8b05e0df7a2fa (MD5) === Made available in DSpace on 2014-07-17T16:49:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertacao Guilherme Thomazi.pdf: 2020976 bytes, checksum: 98e8bd3f32246c587da8b05e0df7a2fa (MD5) === The p53 protein is frequently associated with human and animal cancer. This protein is
involved in the regulation of cell cycle, angiogenesis and apoptosis. The aim of this work
was to analyze modification on TP53 gene sequence, as well as the relative expression of
several cancer related genes in dog´s tumors. A total of 50 neoplasias were evaluated by
classical histopathological analysis, SSCP profiles of exons 5, 6 and 7, and sequencing of
intron5-exon7 region of TP53. Most of these tumors (n=45) were evaluated for the
expression of TP53, p21, MDM2, Bax, Bcl2, IGF-BP3, VEGF and bFGF genes by qRTPCR.
The results showed that breast cancer, particularly the complex tubular-papilary, are
the most common in dogs. The prevalence of cancer in dogs is related with the age and
breed. High frequency of SSCP altered patterns were detected in canine tumors. However,
this technique, pointed out as efficient by several authors, has complex and subjective
interpretation, and it did not show relation with our sequence data. Heterozygotic
alterations in exons 6 and/or 7 of TP53, which may compromise p53 protein function, were
detected in 40% of the tumors. A homozygotic transition GA at the codon 270
(arghis), known as a hotspot on the DNA-binding domain of p53, was detected in an
osteossarcoma. Alteration detected in the intronic regions 5 and 6 of TP53 are probably not
involved in RNA processing. High variation of the relative expression of TP53, p21,
MDM2, Bax, Bcl2, IGF-BP3, VEGF and bFGF genes were detected in both mammary and
skin tumors. However, it was not possible to establish clear relation among genes
expression, or between expression and TP53 alterations. IGF-BP3gene was over or under
express in 60% of skin tumors, but no alterations were found in mammary tumors.
Conversely, 82.9% of mammary tumors exhibited Bax over-expression, while skin tumors
showed a control-like behavior. Although considered as prognostic markers, it was not
detected relation between TP53, p21, MDM2, Bax, Bcl2, IGF-BP3, VEGF and bFGF genes
and histopathological grade.
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