Summary: | Os trabalhos de monitoramento de resistência a fungicidas fornecem informações importantes para definir estratégias de manejo de doenças e evitar aplicações desnecessárias de fungicidas. O objetivo do trabalho foi: i) Avaliar a eficiência do método de microtitulação colorimétrica para determinar a sensibilidade do fungo Corynespora cassiicola e realizar o monitoramento da sensibilidade a fungicidas inibidores da desmetilação (IDM), metil benzimidazol carbamato (MBC) e inibidores da quinona oxidase (IQo); ii) Realizar a caracterização morfológica e patogenicidade de espécies do fungo Colletotrichum spp. isolados de plantas de soja e o monitoramento da sensibilidade do fungo aos fungicidas IDM, MBC e IQo. Para avaliar a eficiência do método de microtitulação colorimétrica foi comparado os valores de CE50 (concentração efetiva para reduzir metade do crescimento da colônia do fungo) para isolados de C. cassiicola, obtidos pelo método de inibição de crescimento micelial, com valores obtidos pelo método de microtitulação. Os valores de CE50 obtidos pelo método de microtitulação apresentaram correlação de 0,90 e 0,88 com os valores obtidos pelo método de crescimento micelial, para carbendazim e protioconazol, respectivamente. No monitoramento da sensibilidade as CE50 para C. cassiicola para carbendazim (MBC) variaram de 0,0045 a 14,27 μg mL-1 e 0,69 a 2,66 μg mL-1, respectivamente para os isolados do PR e MT; para piraclostrobina (IQo) variaram de 4,17 a 44,91 μg mL-1 e 0,29 a 20,43 μg mL-1, respectivamente, para os isolados do PR e MT; para o protioconazol (IDM) variaram de 0,0033 a 45,11 μg mL-1 (média 4,84 μg mL-1) e 0,0044 a 17,70 μg mL-1 (média 1,90 μg mL-1) para os isolados do PR e MT, respectivamente. Na análise morfológica dos isolados de Colletotrichum spp., foi avaliada o índice de velocidade de crescimento micelial (IVCM); coloração da colônia, borda e reverso da colônia em meio de cultura BDA; presença de peritécio, acérvulo e massa conidial; tamanho e forma dos esporos classificadas em agudo, arredondado e clavado; e severidade em folhas de soja destacadas. Os 87 isolados de Colletotrichum spp., foram classificados como pertencentes a espécie Glomerella glycines ou a fase anamórfica C. truncatum ou, destes 29 foram patogênicos a soja. Análise de agrupamento de dados separou os isolados em 15 e 16 grupos para o experimento 1 e 2 respectivamente, não sendo possível uma diferenciação dos isolados de Colletotrichum spp., como patogênico ou não patogênico a soja, levando em consideração apenas os atributos qualitativos e quantitativos avaliados. Os isolados patogênicos foram utilizados no teste de monitoramento de sensibilidade. As CE50s para C. truncatum variaram de 1,89 a 2,93 μg mL-1 para carbendazim (MBC); de 0,36 a 5,39 μg mL-1 para piraclostrobina (IQo) e de 0,051 a 4,67 μg mL-1 (média 1,39 μg mL-1) para protioconazol (IDM). === The sensitivity monitoring to fungicides provide important information to define disease management strategies and avoid unnecessary fungicide applications. The objectives of this study were: i) evaluate the efficiency of the colorimetric microtiter method to determine the sensitivity of the fungus Corynespora cassiicola and perform sensitivity monitoring of fungus toward demethylation inhibitors (DMI), methyl benzimidazole carbamates (MBC) and the quinone outside inhibitors (QoI) fungicides; ii) Perform morphological characterization and pathogenicity of fungus Colletotrichum spp. species isolated from soybean plants and the sensitivity monitoring of fungi toward fungicides DMI, MBC and QoI. To evaluate the efficiency of the colorimetric microtiter method was compared EC50 values (half-maximal effective concentration) to isolates of C. cassiicola obtained by mycelial inhibition growth method with values obtained by microtiter method. The EC50 obtained by microtiter method presented a correlation of 0.90 and 0.88 (p<0.05) with values obtained by mycelial inhibition growth assay for carbendazim and prothioconazole, respectively. On sensitivity monitoring the EC50s of C. cassiicola for carbendazim (MBC) ranged from 0.0045 to 14.27 μg mL-1and 0.69 to 2.66 μg mL-1 respectively for the isolated collected in PR and MT; for pyraclostrobin (QoI) ranged from 4.17 to 44.91 μg mL-1 and 0.29 to 20.43 μg mL-1, respectively, for isolates of PR and MT; for prothioconazole (DMI) ranged from 0.0033 to 45.11 μg mL-1 (mean 4.84 μg mL-1) and 0.0044 to 17.70 μg mL-1 (median 1.90 μg mL-1) for isolates of PR and MT, respectively. In the morphological analysis of the isolates Colletotrichum spp., the mycelial growth rate index (IVCM) was evaluated; colors, border and reverse colony staining in PDA culture medium; presence of perithecium, acervulum and conidial mass; size and shape of the spores classified as acute, rounded and curved; and severity in leaves highlighted. The 87 isolates of Colletotrichum were classified as belonging to Glomerella glycines species or the anamorphic C. truncatum, these 29 were pathogenic to soybean. Data cluster analysis separates the isolates in 15 and 16 groups for experiment 1 and 2 respectively, and it is not possible to differentiate the isolates of Colletotrichum spp. as pathogenic or non pathogenic to soybean, taking into account their own qualitative and quantitative attributes. Only pathogenic isolates were used in the sensitivity monitoring test. The CE50s for C. truncatum ranged from 1.89 to 12.93 μg mL-1 for carbendazim (MBC); 0.36 to 5.39 μg mL-1 for pyraclostrobin (IQo) and 0.051 to 4.67 μg mL-1 (mean 1.39 μg mL-1) for prothioconazole (MDI).
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