Identificação molecular do genótico 3b do vírus da hepatite E em fígado, bile e amostras fecais de suínos assintomáticos de rebanhos brasileiros

• Main Author: Noemi Rovaris Gardinali
• Other Authors: Amauri Alcindo Alfieri .
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Estadual de Londrina. Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal. 2011
• Online Access: http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000176462

A hepatite E, causada pela infeccao pelo virus da hepatite E (HEV), e um problema de saude publica em paises industrializados e em desenvolvimento. Suinos domesticos sao reservatorios do virus e alguns casos de hepatite E podem ser adquiridos pelo consumo de visceras de suinos, contato com as fezes de animais portadores do virus ou por contaminacao ambiental. A exposicao ocupacional (granjeiros, veterinarios e trabalhadores de abatedouros) e considerada fator de risco para a infeccao pelo HEV. O objetivo desse estudo foi avaliar a presenca do HEV em fezes, bile e no figado de suinos assintomaticos. Foram colhidas 170 amostras de fezes de suinos de diferentes categorias (reproducao, leitoes lactentes e desmamados e animais de terminacao) e 118 amostras de bile e figado de animais em idade de abate. As amostras foram provenientes de 24 rebanhos suinicolas da regiao oeste do estado do Parana, sendo as amostras fecais colhidas em 14 rebanhos e as amostras de bile e figado, colhidas em um frigorifico, provenientes de 10 rebanhos. A identificacao do HEV nas amostras biologicas foi realizada por nested PCR. Nas amostras fecais foram utilizados dois sistemas de nested PCR sendo um direcionado para a ORF2 do HEV e utilizado como triagem e outro direcionado para a ORF1. Esse ultimo, tambem utilizado nas amostras de bile e figado. Os produtos amplificados foram sequenciados para a identificacao e realizacao das analises filogeneticas. O RNA do HEV foi identificado em 26/170 (15,3%) das amostras fecais de animais e em 10/14 (71,4%) rebanhos. Em animais provenientes de abatedouro o virus foi detectado em 1 (0,84%) amostra de bile e em 2 (1,7%) amostras de figado. Por analises filogeneticas, todas as estirpes de HEV foram identificadas como pertencentes ao genotipo 3b. Os resultados demonstram a ampla distribuicao do HEV nos rebanhos avaliados e a presenca da infeccao em suinos assintomaticos provenientes da regiao oeste do estado do Parana. O genotipo (3b) do HEV identificado nesse estudo, apresentou alta similaridade com estirpes virais de origem humana. Considerando o aspecto zoonotico da infeccao, a identificacao do HEV em excrecoes e em visceras de suinos assintomaticos pode apresentar reflexos principalmente em saude publica. === Hepatitis E, caused by infection with hepatitis E virus (HEV), is a major public health concern in developing and industrialized countries. Domestic pigs are reservoirs of HEV, and some cases of hepatitis E can be acquired through consumption of contaminated pork offal, contact with the feces of animals carrying the virus or environmental contamination. Occupational exposure to pigs by farmers, veterinarians, and slaughterhouse workers has been linked to an increased risk of HEV infection. The aim of this study was to evaluate HEV presence in feces, bile and liver samples from asymptomatic pigs. A total of 170 porcine fecal samples from different categories production (breeder sows and boars, suckling piglets, weaned, and growing pigs) and 118 samples of bile and liver samples from pigs at slaughter age were collected. The samples were from 24 pig herds from West region of Parana state. The fecal samples were collected from 14 herds, and bile and liver samples that were collected at a slaughterhouse were from 10 herds. The HEV identification from biological samples was tested with nested PCR. The fecal samples were tested with two sets of primers designed to amplify ORF2 region for the screening test, and ORF1 region. HEV RNA identification performed in bile and liver samples was done targeting ORF1 region. The amplified products were sequenced for identification and phylogenetic analyses. HEV RNA was detected in 26/170 (15.3%) of the porcine fecal samples, and from 10/14 (71.4%) farms. From the slaughtered animals, HEV RNA was identified in 1 (0.84%) and 2 (1.7%) bile and liver samples, respectively. The phylogenetic analyses allowed the identification of all HEV strains as belonging to genotype 3 subtype 3b. The results demonstrate the widespread distribution of HEV in the surveyed farms, and the infection in asymptomatic pigs from the western region of Parana state. HEV genotype 3b, identified in the present study, shows high similarity with human HEV strains. Considering the zoonotic aspect of the infection, HEV identification in excretions and offal from asymptomatic pigs may have a reflection especially in public health.