Avaliação do efeito citotóxico, mutagênico e apoptótico e analise da proliferação de células HT-29 tratadas com cubebina

• Main Author: Andressa Megumi Niwa
• Other Authors: Mário Sérgio Mantovani .
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Estadual de Londrina. IAPAR. EMBRAPA. Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Genética e Biologia Molecular. 2011
• Online Access: http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000164149

Produtos naturais que apresentam propriedades benéficas para o organismo humano são de grande interesse dos pesquisadores. A cubebina, extraída da semente da pimenta Piper cubeba, vem mostrando resultados promissores, como significante potencial anti-inflamatório, analgésico e tripanocida. A fim de investigar a segurança da utilização desta lignana, o presente trabalho teve como objetivo analisar a citotoxicidade, mutagenicidade, cinética de proliferação celular, indução de apoptose e expressão gênica em células de adenocarcinoma de cólon humano (HT-29) tratadas com cubebina. O ensaio de citotoxicidade MTT foi realizado para determinação das concentrações a serem utilizadas. Nesse ensaio foi verificado que apenas a maior concentração de cubebina testada (100 µg/mL) foi citotóxica. Dessa forma, nos demais testes, a cubebina foi avaliada nas concentrações 1, 5 e 10 µg/mL. Foi verificado que a cubebina não é mutagênica no ensaio do micronúcleo, não altera a cinética de crescimento celular e não induz apoptose em tratamento por 24 horas. A expressão dos genes CASP8 e CASP9 não foi alterada em tratamento por 12 horas com cubebina 10 µg/mL e 25 µg/mL. A partir dos dados observados, pode-se inferir que a cubebina, nas condições testadas, é citotóxica em concentrações a partir de 100 µg/mL, sugerindo que seja evitado o uso dessa concentração para seres humanos. Porém, concentrações menores não apresentaram atividades prejudiciais (mutagenicidade e alteração de ciclo celular), contribuindo para seu uso seguro nas concentrações estudadas para fins farmacológicos. === Natural products that exhibit beneficial properties to the organism are attracting increasing researchers´ interest. The cubebin, extracted from the seeds of the pepper Piper cubeba, has shown promising results, as significant potential anti-inflammatory, analgesic and trypanocidal. In order to investigate the safe use of this lignan, this study aims to examine the cytotoxicity, mutagenicity, cell proliferation kinetics, induction of apoptosis and gene expression in human colon adenocarcinoma cells (HT-29) treated with cubebin. The MTT cytotoxicity assay was performed to determine the concentrations to be used. In this test we noticed that only the highest concentration of cubebin tested (100 µg/ml) was cytotoxic. Thus, cubebin was tested at 1, 5 and 10 µg/mL concentrations in other tests. It was found that cubebin is not mutagenic by the micronucleus test, does not alter the kinetics of cell growth and does not induce apoptosis in treatment for 24 hours. The expression of genes CASP8 e CASP9 was not altered in treatment for 12 hours with cubebin 10 µg/mL e 25 µg/mL. Observing data, we can suggest that cubebin, under the conditions tested, is cytotoxic in concentrations higher than 100 µg/mL, suggesting warning about the use of this concentration for humans. However, lower concentrations have no harmful activities (mutagenicity and alteration of cell cycle), contributing to its safe use in the studied concentrations for pharmacological purposes.