Purificação e caracterização de uma toxina enterotóxica, citotóxina e letal produzida por amostras de Plesiomonas shigelloides isoladas de água de rio.

Amostras de Plesiomonas shigelloides, isoladas de água de rio, produziram uma citotoxina denominada LCF (Fator Citotóxico Letal), ativa em células Vero, CHO, CaCo-2 e HT-29, causando vacuolizações intracelulares e retração dos núcleos, levando á morte por apoptose. Esta citotoxina foi purificada...

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Main Author: Marilucia dos Santos Ludovico
Other Authors: Tomomasa Yano
Language:Portuguese
Published: Universidade de São Paulo 2008
Subjects:
Online Access:http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-22092008-140217/
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spelling ndltd-IBICT-oai-teses.usp.br-tde-22092008-1402172019-01-22T02:14:46Z Purificação e caracterização de uma toxina enterotóxica, citotóxina e letal produzida por amostras de Plesiomonas shigelloides isoladas de água de rio. Purification and caracterization of an enterotoxic, cytotoxic and lethal toxin produced by Plesiomonas shigelloides isolated from river water. Marilucia dos Santos Ludovico Tomomasa Yano Gleize Villela Carbonell Antonio Fernando Pestana de Castro Terezinha Knöbl Andrea Micke Moreno Plesiomomas shigelloides Atividade letal Cardiotoxina Citotoxinas Enterotoxinas Purificação Plesiomomas shigelloides Cardiotoxin Citotoxin Enterotoxin Lethal activity Purification Amostras de Plesiomonas shigelloides, isoladas de água de rio, produziram uma citotoxina denominada LCF (Fator Citotóxico Letal), ativa em células Vero, CHO, CaCo-2 e HT-29, causando vacuolizações intracelulares e retração dos núcleos, levando á morte por apoptose. Esta citotoxina foi purificada e seu peso molecular estimado em 48 kDA. É uma citotoxina termolábil e foi parcialmente neutralizada por antisoro anti-LT-1 (enterotoxina termolábil tipo 1 de Escherichia coli) e pelo antisoro anti-Aerolisina de Aeromonas. O antisoro anti-CT (enterotoxina colérica) não neutralizou sua atividade. Em teste \"Western blot\" para anti-LT-1, não ocorreu reação sorológica. O LCF induziu acúmulo de fluido em intestino de camundongos recém-nascidos e alças intestinais de coelhos. O LCF foi letal para camundongos e ratos, levando-os a morte cardíaca súbita quando injetado por via intravenosa. Considerando os resultados obtidos, neste estudo, as amostras de P. shigelloides isolados de água de rio, mostraram grande potencial como patógeno para o homem e animal. Plesiomonas shigelloides is a ubiquous microorganism recognized as putative human and animal enteropathogen. Production of toxins has been related to their role in pathogenicity. At previous studies we detected a cytotoxin, named LCF (Lethal Citotoxic Factor) active on a variety of cells, causing intensive intracellular vacuolation and nuclear condensation, leading to death. The toxin purification revealed a heat-labile protein of about 48 kDa by electrophoresis analysis in poliacrylamide gel (SDS-PAGE). The cytotoxic activity was partially neutralized by anti-LT-1 (type 1 termolabile enterotoxin of Escherichia coli) and by anti-aerolisin (cytotoxic enterotoxin of Aeromonas). Western blot analysis to anti-LT-1 showed no serological reaction. Fluid accumulation occurred when toxin was applied to the intestine of newborn mice and to rabbit intestinal loop assays. LCF was lethal to mice and rats, leading them to cardiac death when injected intravenously. Considering the results, these isolates of P. shigelloides have shown great potential as pathogens. 2008-07-08 info:eu-repo/semantics/publishedVersion info:eu-repo/semantics/doctoralThesis http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-22092008-140217/ por info:eu-repo/semantics/openAccess Universidade de São Paulo Ciências Biológicas (Microbiologia) USP BR reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP instname:Universidade de São Paulo instacron:USP
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Marilucia dos Santos Ludovico
Purificação e caracterização de uma toxina enterotóxica, citotóxina e letal produzida por amostras de Plesiomonas shigelloides isoladas de água de rio.
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