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Previous issue date: 2017-02-13 === Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES === Pesticides are widely used in agriculture, among them there are the triazines
(atrazine, cyanazine, propazine, simazine, terbuthylazine, tetrazine), the phosphonated
amino acids (glyphosate), the benzenamines (phenylamine, phenylenediamine,
dinitroaniline, pedimetalin), organophosphates (fenitrothion), the phenyl pyrazoles
(fipronil) e triazolones (sufentrazone). Therefore, they widely use of them is one of the
factors which affects amphibians development, reproduction and survival. Among the
pesticides most used worldwide, included in Brazil, are herbicides. However, its toxic
effects in animals and plants have not been yet sufficiently study. This work aimed to
study the effect of isolated and mixture of Boral ? and Glifosato ? herbicides on the
biochemical composition and oxidative balance in the liver and muscle; levels of
glucose, uric acid and corticosterone in plasma, and nutritional condition factors in
tadpoles of bullfrogs ( Rana catesbeiana Shaw, 1802 ). Was used sixty tadpoles in
prometamorphosis stage, no apparent members, acquired in a frog farm, and these,
weighed, measured and distributed in tanks under controlled temperature (23?C),
photoperiod (12h light: 12h dark) constant aeration, fed with commercial rations for
seven days (C 7 ). After this, some animals continued under these conditions (C 14 ) e
another it was divided into three groups which will be exposed to Boral ? 500 SC
(sulfentrazone: 130?g/L), to Glifosato ? (glyphosate: 234?g/L) and to mixture Boral ?
500 SC and Glifosato ? (130?g/L + 234?g/L, respectively) for seven days. After the
acclimation period (7 days) tadpoles of control 7 group had blood samples collected by
cardiac puncture with heparinized syringe, then euthanized. They was weighed,
measured and removed the liver, intestine (only to determinate an index), and muscle
tissue. The tissues were immediately freeze in liquid nitrogen and homogenized for
determination of activity of the enzymes Superoxide Dismutase, Catalase and
Glutathione S-transferase, e TBARS levels, an indicator of Lipid Peroxidation (LPO,
Lipid Peroxide Levels). The same procedures will used after the exposure period ending
in animal control 14 days (C 14 ) and the exposed groups to herbicides (B, G and BG
groups). We statistically compared the treatment groups C 7 e C 14 (Student T test for
independent sample), as well as the control groups (C 14 e exposed). We observed on the
three first acclimation days an animal mortality of 25%. We compared this percentage
to major part of parameters analyzed, except glucose plasmatic and liver enzymes
activity (SOD, CAT and GST) of groups acclimation control (C 7 ) and control 14 days
(C 14 ) and this comparison was not different statistically. This difference in parameters
can indicate that during the acclimation period the tadpoles showed a stress level,
possibly because of adaptation process to culture conditions that justify the mortality
percentage observed. We highlight that to scientific paper elaboration were used as
control the animals of C 14 group, because this animals has the same time of life that the
exposed animals and allied to answer to adaptation process reinforces this choice. We
compared the C 14 group with exposed groups (B, G and BG groups) using
Kolmogorov-Smirnov Test and we detected a non-parametric distribution to all
parameters analyzed, so we used the Kruskal-Wallis Test and Student-Newman-Keuls
Test a posteriori, to detect the differences between the groups to p<0,05. We verify a
survey of 91.7%, those demonstrate that chosen herbicides concentrations was
sub-lethal, Thus showing that the cultivation system was adequate to maintenance of
animals. Even in low concentrations, similar of those found in natural environment, this
herbicides induced changes in parameters analyzed, mainly in specific conduction level
(K intestine ); in triglycerides levels, acid uric and corticosterone plasmatic, and in SOD CAT and GST antioxidants enzymes activity, primordially the GST modeling the lipid
peroxidation levels in liver and muscle tissues. This alterations looks linked to an
increment of energy demand in an attempt to maintain homeostasis and ensure the
survival of the animals, decreasing the energy available for growth and metamorphosis,
which may compromise the adult life cycle. We suggest that sulfentrazone and
glyphosate mixture seems to be more harmful to animals, mainly by the maintenance
and drastic reduction of the levels of Glutathione S-tansferase activity in the liver and
caudal muscle, respectively. === Dentre os qu?micos agr?colas, destacamos triazinas, amino?cidos fosfonados,
benzenaminas, organofosforados, fenilpiraz?is e aril triazolinonas por seu uso excessivo
? um dos fatores que afetam o desenvolvimento, reprodu??o e sobreviv?ncia de
anf?bios. Dentre os agroqu?micos mais utilizados mundialmente (inclusive Brasil) est?o
os herbicidas. Seu amplo uso ? um dos fatores que afetam o desenvolvimento,
reprodu??o e sobreviv?ncia dos anf?bios. Contudo, seus efeitos t?xicos em animais n?o
foram ainda suficientemente estudados. Dessa forma, neste trabalho objetivamos
estudar o efeito isolado e em mistura dos herbicidas Boral ? 500 SC e Glifosato ? sobre
uma s?rie de par?metros bioqu?mico-funcionais (n?veis de glicose; ?cido ?rico e
corticosterona) no plasma, o balan?o oxidativo no f?gado e no m?sculo e sobre
par?metros de condi??o nutricional em girinos de r?-touro ( Rana catesbeiana Shaw,
1802 ). Para tanto, utilizamos oitenta girinos em est?gio de pr?-metamorfose (aus?ncia
de membros aparentes) e adquiridos em ran?rio. Estes foram pesados, medidos e
distribu?dos em aqu?rios sob condi??es controladas de temperatura (23 ? 2?C),
fotoper?odo (12h luz:12h escuro), aera??o constante, alimentados uma vez ao dia com
ra??o comercial durante sete dias (grupo controle 7 - C7). Ap?s esse per?odo, parte dos
animais continuou nessas condi??es (controle 14- C 14 ) e, o restante dividido em tr?s
grupos sendo expostos a Boral ? 500 SC (sulfentrazone: 130?g/L), Glifosato ? (glifosato:
234?g/L) e uma mistura de Boral ? mais Glifosato ? (130?g/L mais 234?g/L,
respectivamente) durante mais sete dias. Depois do per?odo de aclimata??o (7 dias)
girinos do grupo controle (C 7 ) tiveram amostras de sangue coletadas por pun??o
card?aca, com seringa heparinizada e ent?o eutanasiados. Estes animais foram pesados,
medidos e foi removido o f?gado, o intestino (somente para determinar os par?metros de
condi??o nutricional), e parte do m?sculo caudal. Os tecidos foram imediatamente
congelados em nitrog?nio l?quido para determina??o da atividade das enzimas
antioxidantes Super?xido Dismutase (SOD), Catalase (CAT), Glutationa S-transferase
(GST), e n?veis de TBARS, um indicador de Lipoperoxida??o (LPO). Os mesmos
procedimentos foram utilizados depois do t?rmino do per?odo de 14 dias para o grupo
controle C 14 e aos grupos expostos aos herbicidas (B; G; e BG). N?s comparamos
estatisticamente os grupos C 7 e C 14 por Teste T Student para amostras independentes.
Cabe ressaltar que nos tr?s primeiros dias de aclimata??o observamos uma mortalidade
de 25% dos animais. Ao compararmos os resultados obtidos para a maior parte dos
par?metros analisados, com exce??o da glicose plasm?tica e da atividade das enzimas
(SOD, CAT e GST) no f?gado dos animais do grupo controle aclimata??o (C 7 ) e do
controle tempo de cultivo total (C 14 ), n?o existiu diferen?a. Tal diferen?a nestes
par?metros pode indicar que durante o per?odo de aclimata??o os girinos apresentaram
um grau de estresse, possivelmente em virtude da adapta??o as condi??es de cultivo o
que justifica a taxa de mortalidade observada. Ressaltamos que para elabora??o do
artigo cient?fico foram usados como controle os animais do grupo C 14 , pois estes
animais tem o mesmo tempo de vida que os animais expostos; o que aliado ao perfil de
resposta, descrito acima, refor?a tal escolha. Ao compararmos o grupo C 14 aos grupos
expostos (B; G e BG) pelo teste de Kolmogorov-Smirnov detectamos uma distribui??o
n?o param?trica para todos os par?metros analisados sendo ent?o, utilizado o Teste
Kruskal-Wallis com complementar de Student-Newman-Keuls para detectar as
diferen?as entre os grupos, para um p<0,05. N?s verificamos que houve taxa de
sobreviv?ncia de 91.7%, o que demonstra que as concentra??es escolhidas dos
herbicidas foram subletais; evidenciando assim, que o sistema de cultivo se mostrou adequado ? manuten??o dos animais. Mesmo em baixas concentra??es, semelhantes
?quelas encontradas em ambiente natural, estes herbicidas induziram altera??es nos
par?metros analisados, principalmente no fator de condi??o espec?fico (K intestinal ); nos
n?veis de triglic?rides, de ?cido ?rico e de corticosterona plasm?ticos; e na atividade das
enzimas antioxidantes SOD, CAT e primordialmente a GST modulando os n?veis de
peroxida??o lip?dica no f?gado e m?sculo caudal. Estas altera??es parecem estar ligadas
a um incremento da demanda energ?tica na tentativa de manter a homeostase e garantir
a sobreviv?ncia dos animais; diminuindo assim, a energia dispon?vel para o crescimento
e a metamorfose o que pode comprometer o ciclo de vida adulto. Podemos sugerir que a
mistura de sulfentrazone e glifosato parece ser mais lesiva aos animais, principalmente
pela manuten??o e diminui??o dr?stica dos n?veis de atividade da Glutationa S-tanferase
no f?gado e no m?sculo caudal, respectivamente.
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