Desenvolvimento e aplica??o de copol?mero absorv?vel como c?mara de regenera??o de nervo perif?rico em ratos

• Main Author: Sebben, Alessandra Deise
• Other Authors: Silva, Jefferson Luis Braga da
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul 2015
• Subjects: MEDICINA; SISTEMA NERVOSO; MATERIAIS BIOCOMPAT?VEIS; REGENERA??O NERVOSA; CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
• Online Access: http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/6444

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS ([e-mail]) on 2015-12-28T12:22:52Z No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) === Made available in DSpace on 2015-12-28T12:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 === Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES === Introduction: Peripheral nerve injury results in functional loss in the innervated organ, and recovery without surgical intervention is rare. Many surgical techniques can be used for nerve repair. Among these, the tubulization technique can be highlighted: this allows regenerative factors to be introduced into the chamber. Biomaterials and neurotrophic factors are indicated as a therapeutic alternative for reconstruction of peripheral nerves. Objective: To develop a nanotextured absorbable tube of poly(lactic-co-glycolic acid), and to evaluate its effect with and without tacrolimus on peripheral nerve regeneration in rats. Materials and Methods: Nanotextured absorbable PLGA tubes and films with and without incorporation of tacrolimus are developed, which were characterized in vitro and in vivo biocompatibility, biodegradability and effectiveness as technical tubing were fabricated. The in vivo experiment in which 88 rats were used, occurred in two stages: the copolymers with and without tacrolimus were implanted in 63 animals to evaluate the biocompatibility; a defect of 10mm sciatic nerve was created in the remaining 25 animals were divided into three groups according to treatment: autograft (5), tubulization with PLGA (10), tubulization with PLGA and tacrolimus (10). Walking Track and histomorphometric analyses were performed. Results: Nanotextured PLGA films, containing tacrolimus or not, differ from the negative control cell viability in vitro assays (p=0.000). The film containing tacrolimus was significantly improved, regardless of the time, when compared to the film without the drug (p=0.026). In vivo biocompatibility evaluation demonstrated a surrounding tissue to PLGA implants with acute inflammation, which was decreasing the long 90 days evaluation. It was evident less collagen deposition in both biomaterials, p ? 0.020 seven days after the implants were inserted. The PLGA tube without tacrolimus had smaller average response to the thickness of the myelin sheath compared to autograft and the tube containing tacrolimus in proximal, medial and distal segments (p<0.05). In functional assessment of the recovery of the sciatic nerve in rats, the group of PLGA without tacrolimus significantly differed from the 90 days autograft group (p= 0.0020). Conclusion: The present study suggests that the combination of tacrolimus and PLGA promoted the regeneration of rat sciatic nerves, and this can be a powerful alternative to clinical use in peripheral nerve injuries. === Introdu??o: Les?es em nervos perif?ricos resultam na perda de fun??o do ?rg?o inervado e raramente apresentam recupera??o sem a interven??o cir?rgica. Uma das formas de reparo ? a t?cnica de tubuliza??o, atrav?s da qual ? poss?vel acrescentar fatores com capacidade regenerativa. Nesse contexto, biomateriais e fatores neurotr?ficos s?o indicados como uma alternativa terap?utica para reconstru??o de nervos perif?ricos. Objetivo: Desenvolver tubo nanotexturizado absorv?vel composto por poli (?cido l?ctico-co-?cido glic?lico), e avaliar seu efeito sem e com incorpora??o de tacrolimus sobre a regenera??o de nervo perif?rico em ratos. Materiais e M?todos: Foram confeccionados tubos nanotexturizados absorv?veis de PLGA com e sem incorpora??o de tacrolimus, que foram caracterizados in vitro e in vivo quanto ? biocompatibilidade, biodegrada??o e efic?cia como t?cnica de tubuliza??o. O experimento in vivo, no qual foram utilizados 88 ratos, ocorreu em 2 etapas: os copol?meros sem e com incorpora??o de tacrolimus foram implantados em 63 animais para avaliar a biocompatibilidade; um defeito de 10mm no nervo ci?tico foi criado nos 25 animais restantes, os quais foram divididos em tr?s grupos conforme o tratamento: enxerto aut?logo (5), tubuliza??o com tubo PLGA (10) e tubuliza??o com tubo PLGA e tacrolimus (10). Foram realizados Teste de Marcha e an?lise histomorfom?trica. Resultados: As membranas de PLGA, contendo ou n?o tacrolimus, diferiram do controle negativo nos ensaios de viabilidade celular in vitro (p=0,000); a membrana contendo tacrolimus foi significativamente melhor, independentemente do tempo, quando comparada ? membrana sem o f?rmaco (p=0,026). Na avalia??o da biocompatibilidade in vivo, o tecido circunjacente aos implantes de PLGA apresentaram inflama??o aguda, que foi decrescendo ao longo dos 90 dias de avalia??o. Em 7 dias ap?s os implantes serem inseridos, evidenciou-se menor deposi??o de col?geno nos dois biomateriais quando comparado aos demais per?odos (p ? 0,020). O tubo de PLGA sem tacrolimus teve m?dia menor em rela??o ? espessura da bainha de mielina comparado ao enxerto aut?logo e ao tubo contendo tacrolimus nos segmentos proximal, medial e distal (p < 0,05). Na avalia??o funcional da recupera??o do nervo ci?tico de ratos, o grupo de PLGA sem tacrolimus diferiu significativamente do grupo enxerto aut?logo (em 90 dias | p= 0,0021), com menores ?ndices de fun??o ci?tica. Conclus?o: o presente estudo sugere que a combina??o de PLGA e tacrolimus favoreceu a regenera??o de nervo ci?tico de rato, e esta poder? ser uma potente alternativa para aplica??o cl?nica em les?es de nervos perif?ricos.