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Suzianny Maria Bezerra Cabral Silva.pdf: 1259614 bytes, checksum: e36cf9293552877b5a90863a34eee04d (MD5) === Made available in DSpace on 2017-02-22T13:02:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2010-02-01 === Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq === The Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei is the most important shrimp species in volume in world aquaculture. However, in recent decades, outbreaks of several diseases, especially viral diseases, were responsible for significant economic losses, threatening the sustainability of shrimp farming worldwide. In 2004, Brazilian shrimp farming was seriously affected by a new disease, caused by the Infectious myonecrosis virus (IMNV). Thus, disease control based on rapid and sensitive pathogen detection methods has become a priority worldwide. In this study, specific quantification method for IMNV was developed using real-time PCR with SYBR Green dye and viral load of the principal target tissues was quantified. A recombinant plasmid that contains the target IMNV sequence was constructed and a linear relationship between plasmid DNA and Ct values (R² = 0.992) was obtained for a range from 108 to 10² copies of IMNV. Viral load of IMNV was different for various tissues, being higher in haemolymph and muscle, followed by pleopods and gill. === O camarão marinho (Litopenaeus vannamei) é a mais importante espécie de camarão em volume na aqüicultura mundial. Entretanto, nas últimas décadas, surtos de diversas doenças especialmente as de etiologia viral foram responsáveis por perdas econômicas significativas,ameaçando a sustentabilidade da carcinicultura mundial. Em 2004, a carcinicultura brasileira foi seriamente afetada por uma nova doença, causada pelo vírus da Mionecrose infecciosa (IMNV). Assim, o controle de doenças baseado em métodos de detecção rápida e sensível de patógenos tornouse uma prioridade em nível mundial. No presente estudo, um método específico de quantificação para IMNV foi desenvolvido usando PCR em tempo real com o corante SYBR Green e a carga viral dos principais tecidos-alvo usados para o diagnóstico de IMNV foi determinada. Um plasmídeo recombinante contendo uma seqüência do vírus foi construído e uma relação linear de 0,992 foi obtida entre a quantidade de DNA plasmidial e os valores de Ct para uma faixa de 108 a 10² cópias de IMNV. A carga viral detectada nos tecidos mostrou que há diferença entre eles e os maiores valores estiveram presentes na hemolinfa e músculo, seguida de pleópodo e brânquia.
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