Perfil fenotípico e genotípico de isolados de Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium de origem avícola frente aos antimicrobianos ceftiofur, gentamicina e enrofloxacina

• Main Author: Biffi, Claudia Pies
• Other Authors: Stefani, Lenita Moura
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Universidade do Estado de Santa Catarina 2016
• Subjects: antimicrobiano; genes de resistência; salmonella; saúde pública; antimicrobial; public health; resistance gene; Salmonella; CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
• Online Access: http://tede.udesc.br/handle/handle/876

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA12MA099.pdf: 1138079 bytes, checksum: 23aa8d31dd88f13180440d19ecde7625 (MD5) Previous issue date: 2012-08-21 === Salmonellosis is responsible for significant economic losses in poultry and serious harm to public health because they are involved in most cases of foodborne illness. Studies of these outbreaks in humans indicate that animal products, in particular poultry, are significant sources of contamination. It is observed that among isolates of Salmonella resistance to antimicrobial agents used routinely in poultry is increasing significantly, including the presence of multidrug resistance. The objective of this study was to investigate the genotypic and phenotypic profile of antimicrobial resistance of Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium from poultry products to Gentamicin, Ceftiofur and Enrofloxacin by the disk diffusion test, minimum inhibitory concentration (MIC) and search for resistance genes by PCR. Salmonella sp. from poultry samples were isolated in a private laboratory from the state of Parana. The isolation was performed as recommended by the Brazilian official methods. Isolates identified as Salmonella sp. were sent to the FIOCRUZ laboratory where they were serotyped. Of these samples, two were identified as S. Enteritidis and eleven as S. Typhimurium. Different levels of resistance were verified when compared diffusion test and MIC. S. Enteritidis was 100% sensitive for Enrofloxacin and Gentamicin and 50% resistant to Ceftiofur according to the diffusion test. As for S. Typhimurium there was resistance to all three antibiotics tested (18.1% for Ceftiofur, 45.4% for gentamicin and 18.1% for Enrofloxacin). In the MIC the isolates of S. Typhimurium were resistant to Ceftiofur (27.2%), Gentamicin (54.5%), and to Enrofloxacin (18.1%). These results were very similar to those observed in the diffusion test. However, the samples of S. Enteritidis had 100% resistance to Gentamicin and 50% for Enrofloxacin and Ceftiofur in the MIC test. Genotypic analysis by PCR showed that S. Typhimurium and S. Enteritidis, either resistant or susceptible to Enrofloxacin, presented at least three (out of four) of the genes responsible for resistance. Regarding Gentamicin and Ceftiofur, resistance genes were found mainly in samples with phenotypic resistance. Interestingly phenotypically resistant strains did not presented the resistance gene, as well as sensitive strains present the gene. These results demonstrate the high degree of resistance to the antibiotics routinely used in poultry, as well as the presence of multidrug resistance. In addition, the fact that some isolates already contain the resistance gene but are not phenotypically expressing it, stress out the possibility that these antimicrobials may become ineffective within a short period of time === As salmoneloses são responsáveis por significativas perdas econômicas na avicultura e por sérios danos à saúde pública, pois estão envolvidas na maioria dos casos de infecções alimentares. Estudos destes surtos em humanos indicam que produtos de origem animal, especialmente avícola, participam de forma significativa como fontes de contaminação. Observa-se que entre os isolados de Salmonella a resistência aos antimicrobianos utilizados rotineiramente na avicultura está aumentando significativamente, além da presença de multirresistência. O objetivo deste trabalho foi verificar o perfil fenotípico e genotípico de resistência antimicrobiana em isolados de Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium de origem avícola frente à Gentamicina, Enrofloxacina e Ceftiofur, através do teste de disco-difusão, concentração inibitória mínima (MIC) e pesquisa de genes de resistência por PCR. Amostras de diversas origens avícolas foram isoladas em um laboratório privado no estado do Paraná, o isolamento foi realizado de acordo com o preconizado pela normativa do MAPA. Os isolados identificados como Salmonella sp. foram enviados para o laboratório FIOCRUZ onde foram sorotipados. Destas amostras, duas foram identificadas como S Enteritidis e onze como S Typhimurium. Após esta etapa as amostras foram avaliadas quanto a sua sensibilidade fenotípica, para isto foram realizados os testes de concentração inibitória mínima e antibiograma. Os resultados desta avaliação mostraram diferentes níveis de resistência nas duas metodologias para os antimicrobianos testados. No antibiograma os isolados de S. Enteritidis foram 100% sensíveis aos antimicrobianos Gentamicina e Enrofloxacina e apresentaram resistência de 50% ao Ceftiofur. Já a S. Typhimurium apresentou resistência em graus variados aos três antimicrobianos testados, 18,1% para o Ceftiofur, 45,4% para Gentamicina e 18,1% para Enrofloxacina. No MIC os isolados de S. Typhimurium apresentaram resistência de 27,2% ao Ceftiofur, 54,5% à Gentamicina e 18,1% à Enrofloxacina, resultados esses muito semelhantes aos observados no antibiograma. Já as amostras de S. Enteritidis tiveram 100% de resistência à Gentamicina e 50% para a Enrofloxacina e Ceftiofur. Na análise genotípica observou-se que as amostras de S. Typhimurium e S. Enteritidis, independente de serem resistentes ou sensíveis fenotipicamente à Enrofloxacina, apresentaram senão os quatro, mas três dos genes responsáveis pela resistência. Com relação à Gentamicina e ao Ceftiofur, os genes de resistência foram encontrados principalmente nas amostras que apresentaram resistência fenotípica. Porém também foram encontradas amostras resistentes fenotipicamente mas que não tinham o gene de resistência, assim como amostras sensíveis que apresentavam o gene. Esses resultados demonstram o elevado grau de resistência das cepas isoladas aos antimicrobianos testados, assim como a presença de multirresistência. Soma-se a isso o fato de amostras possuírem o gene de resistência e não estarem expressando fenotipicamente, salientando que os antimicrobianos rotineiramente utilizados podem tornar-se ineficientes dentro de um curto período de tempo