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Previous issue date: 2009-02-03 === The fungus Stenocarpella maydis usually can cause corn stalk and ear rot. There is little data
on the genetic resistance of maize plants to S. maydis. The Stenocarpella resistance has been
investigated around the world by artificial inoculation techniques with inoculum produced
mostly in fragments of maize plant and sorghum and oats grains. The amount of inoculum
produced by these techniques is low, require a long period of incubation to gave a satisfactory
inoculum levels. Despite of the substrate, temperature and luminosity are essential factors to
stimulate the pathogens sporulation. The objective of this study was to determine an easy,
quick and reproducible method by relative low cost to induce the S. maydis sporulation. The
experiments were carry out at the Plant Pathology Laboratory at the Centro de Ciências
Agroveterinárias- CAV/UDESC during the years 2007/08. The S. maydis monosporic isolate
was obtained from commercial crops naturally infected in the Aberlado Luz County, Santa
Catarina State. Preliminary were carry out a experiment with 20 potentials natural substrates
from grains and leaves and stalks fragments of different plants like, sorghum, wheat, white
oat, black oat, rye, barley and maize , with the objective to select the most promising
substates. Were discarded 13 substrates by not present desirable features in any stage of
preparation, maintenance, production and conidia amount. The remained 07 natural substrates
based in grains of sorghum, wheat, white and black oat, rye, barley and maize were submitted
to temperatures of 21, 24, 27, 30 and 33ºC on continuous light systems and darkness by
period of 12 hours Each substrate was soaked in 100 mL of water for 24 hours in Erlenmeyer.
After removal of excess water, the grains were sterilized twice in autoclave by 20 min at
127ºC. In each flask were added three disks of fungus mycelium. The material was incubated
in growth chamber according to the different temperatures and light regimes. For each
treatment three replicates were used. The assessment of the conidia number per gram of
grains and conidia viability were measured at 15 days of incubation. The data of conidia
number per gram of grain and conidia viability were transformed into √ (x +1) and
subjected to analysis of variance and compared by Bonfferroni test by 1% of significance.
Subsequent tests were done with the best natural substrates with the objective to evaluate
differences between cultivars and the incubation period on the conidia production and
viability. Many cereal grains, oil seeds and crushed fragments of maize can not be used as
substrates to induce S. maydis sporulation. The grains of barley, black oat and wheat were the
best ones for S. maydis conidia production and viability. The barley grain was the natural
substrate that showed the biggest conidia production. The conidia production and viability
were influenced by temperature and photoperiod. The S. maydis developed better at
temperature of 27ºC and 12 h of photoperiod. There is conidia number variation among barley
cultivars, which was not checked for viability of conidia. Same procedure was performed with
Stenocarpella macrospora, however not obtained enough for measurement of spore
production and germination of conidia.
Keywords: Conidia. Diplodia. inoculum production. Zea mays === O fungo Stenocarpella maydis comumente causa podridão do colmo e da espiga em milho.
Pouca informação existe sobre a resistência genética de plantas de milho à S. maydis. A
resistência à Stenocarpella vem sendo investigada em diversas partes do mundo por técnicas de
inoculação artificial a partir de inóculo produzido, principalmente, em fragmentos da planta de
milho e grãos de sorgo e aveia. Neste caso, a quantidade de inóculo produzido é baixa,
necessitando longo período de incubação para a produção de inóculo em níveis satisfatórios.
Além do substrato, temperatura e luminosidade são fatores essenciais para estimular a
esporulação dos fitopatógenos. O objetivo deste trabalho foi determinar um método fácil,
rápido, reproduzível e de baixo custo para a indução à esporulação de S. maydis. O
experimento foi conduzido no Laboratório de Fitopatologia Centro de Ciências
Agroveterinárias da Universidade do Estado de Santa Catarina, CAV/UDESC, Lages, SC, em
2008. O isolado monospórico do fungo foi obtido de grãos de milho naturalmente infectados
oriundos de lavouras comerciais de município de Abelardo Luz, SC. Previamente foram
realizados ensaios com 20 possíveis substratos naturais a partir de compostos de grãos,
fragmentos de folhas e colmos de plantas como sorgo, trigo, aveia branca, aveia preta,
centeio, cevada e milho a fim de selecionar os mais promissores. Foram descartados 13
diferentes substratos naturais que não apresentaram caracteristicas desejáveis em qualquer
etapa de preparação, manutenção, produção e contagem de conídios. Os 07 substratos naturais
de grãos de sorgo, trigo, aveia branca, aveia preta, centeio, cevada e milho, foram submetido
às temperaturas de 21, 24, 27, 30 e 33ºC, em regimes de luz contínua, escuro e por período de
12 horas. Cada substrato foi embebido em 100 mL de água por 24 horas em Erlenmyers. Após
a remoção do excesso de água os grãos foram esterilizados por duas autoclavagens por 20 min
a 127ºC. Em cada Erlenmeyer foram inseridos três discos de micélio do fungo. O material foi
incubado em câmara de crescimento nas respectivas temperaturas e regimes de luz. Para cada
tratamento foram utilizadas três repetições. A avaliação do número de conídios por grama
de grãos e a viabilidade dos conídios foi quantificada aos 15 dias de incubação. Os dados do
número de conídios/g de grãos e a viabilidade dos conídios foram transformados em √(x+1) e
submetidos a análise de variância e comparados pelo teste de Bonfferroni a 1% de
significância. Posteriormente foi realizado ensaio com o melhor substrato natural com o
objetivo de avaliar diferenças entre cultivares e tempo de incubação na produção e viabilidade
de conídios. Muitos grãos de cereais, oleaginosas e fragmentos de milho não podem ser
usados como substratos para induzir a esporulação de S. maydis. Os grãos de cevada, aveia
preta e trigo foram os melhores para produção e viabilidade de conídios de S. maydis. A
cevada foi o substrato natural que apresentou a maior produção de conídios. A produção de
conídios e a viabilidade são influenciadas pela temperatura e fotoperiodo, sendo que S.
maydis responde melhor a temperatura de 27 ºC e fotoperíodo 12 h. Existe variação entre
cultivares de cevada para número de conídios, o que não foi verificado para viabilidade de
conídios. Procedimento igual foi realizado com Stenocarpella macrospora, no entanto não se
obteve esporulação suficiente para mensuração da produção e germinação de conídios
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