Caracterização citoquimica de complexos DNA-proteina contendo variantes de histona H1

• Main Author: Falco, Jose Ricardo Penteado
• Other Authors: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: [s.n.] 1999
• Subjects: Citoquímica; Cromatina
• Online Access: FALCO, Jose Ricardo Penteado. Caracterização citoquimica de complexos DNA-proteina contendo variantes de histona H1. 1999. 57f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, [SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/317813>. Acesso em: 24 jul. 2018.; http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/317813

Orientador: Maria Luiza Silveira Mello === Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia === Made available in DSpace on 2018-07-25T00:17:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Falco_JoseRicardoPenteado_D.pdf: 2833002 bytes, checksum: 94d95638b51ee423178bbf3ea81afed6 (MD5) Previous issue date: 1999 === Resumo: Valores de concentração crítica de eletrólitos (CEC) da cromatina de células (espermatozóides e eritrócitos de frango) conhecidas ou suspeitas de apresentarem variantes da histona HI foram comparados entre si com o objetivo de estabelecer semelhanças ou diferenças nos complexos DNA-proteína em nível citoquímico. A afinidade por moléculas de azul de toluidina em condições de competição com íons Mg2+ foi investigada nos espermatozóides do sapo boi, de ouriços do mar, de abelhas melíferas, de abelhas sem ferrão, de mamangavas e em eritrócitos de frango. Uma íntima relação entre os valores de CEC de Rana catesbeiana e de duas espécies de ouriço do mar com os da cromatina de eritrócitos de frango, que contém a histona H5, foi vista estar de acordo com certas semelhanças bioquímicas e estruturais entre seus complexos DNA-proteína. Quanto aos dados para abelhas, não se pôde associar a variabilidade em valores de CEC com a posição das espécies na respectiva árvore filogenética. Conclui-se, portanto, que a CEC de cromatina de espennatozóides que contêm histona H1 é um indicador útil da influência de variantes de H1 na organização de complexos DNA-proteína, mas é de pouco valor em estudos filogenéticos. Suspeitas cito químicas da presença de histonas H1 na cromatina de espermatozóides de Apis mellifera foram confirmadas através da extração, com PCA 5%, das proteínas básicas nucleares dos espennatozóides de Apis mellifera e eletroforese em gel de poliacrilamida 15% contendo 6,25M de uréia. As bandas detectadas, de pequena mobilidade eletroforética quando comparadas às H1 de timo de bezerro comercial (Sigma) e figado de rato, não foram encontradas em outros órgãos do mesmo animal aqui analisados, sugerindo a presença de histonas H1 com menor basicidade e/ou maior massa molecular relativa e exclusivas de espermatozóides em Apis mellifera === Abstract: The critical electrolyte concentrations (CEC) of spenn chromatin iTom animal species known or suspected to contain histone H1 variants were compared by examining the affinity of their DNA-protein complexes for toluidine blue in the presence of Mg2+. BulliTog, sea urchin, honeybees, stingless bees and bumblebee spennatozoa and chicken erythrocytes were studied. The CEC for Rana catesbeiana and two sea urchin species were similar to that of histone H5-containing chromatin iTom chicken erythrocytes, thus confinning the biochemical and structural similarities of these DNA-protein complexes. The CEC for bees and the bumblebee, Bombus atratus, showed no particular phylogenetic relationship. We conc1uded that the CEC ofhistone Hl-containing spenn cell chromatin is a useful indicator ofvariability _in DNA-protein complexes but is oflittle phylogenetic value. Suspicion that a lysine-rich somatic-like histone (H1) occurs in chromatin spennatozoa of the honey bee were confinned by 5% PCA extraction and electrophoresis in 15% polyacrylamide gels containing 6.25M urea. Five bands with slower migration as compared with the standards were detected. Our data suggest that a lysine-rich histone (H1), spenn specific with lower basic charge density or large molecular mass occurs in the spenn cells of the honey bee === Doutorado === Biologia Celular === Doutor em Biologia Celular e Estrutural