Isolamento e caracterização de uma proteinase dos lisados de trypanosoma cruzi (Chagas, 1909)

• Main Author: Araujo, Paulo Maria Ferreira de, 1948-
• Other Authors: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: [s.n.] 1979
• Subjects: Microbiologia; Imunologia
• Online Access: ARAUJO, Paulo Maria Ferreira de. Isolamento e caracterização de uma proteinase dos lisados de trypanosoma cruzi (Chagas, 1909). 1979. 46 f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, [SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/316830>. Acesso em: 14 jul. 2018.; http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/316830

Orientador : Humberto de Araujo Rangel === Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia === Made available in DSpace on 2018-07-14T03:14:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_PauloMariaFerreirade_D.pdf: 3185759 bytes, checksum: d2c366bb1140e84db853955da681480f (MD5) Previous issue date: 1979 === Resumo: A fração solúvel (FS) de lisados das formas epimastigotas de T. cruzi, contendo diferentes atividades proteolíticas em pH neutro, foi analisada por diferentes métodos, visando-se o isolamento e caracterização de uma proteinase. Empregando-se o método de Anson (1938), as condições de dosagem da atividade proteinásica da FS foram determinadas, usando-se a caseína como substrato, em tampão fosfato 0.05 M pH 7.0. A maior quantidade de produtos TCA-solúveis era obtida, quando a mistura enzima-substrato era incubada a temperaturas entre ¿37 GRAUS¿C e ¿45 GRAUS¿C, por 90 minutos; não se observando alterações apreciáveis na quantidade de produtos após esse período. Uma estimativa do Km foi feita nessas condições, encontrando-se um valor de 2.5 mg da caseína. Essa atividade proteinásica da FS, era maior em presença de EDTA e dos compostos sulfidricos ME e cisteina. Inibição total dessa atividade era obtida, em presença de concentrações 1 mM dos reagentes de grupamentos tiois ('HG POT. 2+¿, iodoacetamida, ácido iodoacético, N-EMI, p-AFMC), havendo reversibilidade desse efeito inibitório, com a adição de 15 mM de ME, exceção feita àquele, resultante do ácido iodoacético. Esses dados sugeriam que a proteinase era do tipo SH-dependente. A proteinase foi purificada 60 vezes, empregando-se a seguinte metodologia: 1) Precipitação a pH 4.5 com 80% de acetona a ¿¿20 GRAUS¿C... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital === Abstract: Not informed. === Doutorado === Doutor em Ciências Biológicas