Isolamento e produção de substancias de interesse farmacologico de Hypericum brasiliense Choisy

• Main Author: Abreu, Ilka Nacif de
• Other Authors: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: [s.n.] 2002
• Subjects: Metabólitos; Plantas medicinais; Farmacologia
• Online Access: ABREU, Ilka Nacif de. Isolamento e produção de substancias de interesse farmacologico de Hypericum brasiliense Choisy. 2002. 167p. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/315484>. Acesso em: 3 ago. 2018.; http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/315484

Orientador : Paulo Mazzafera === Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia === Made available in DSpace on 2018-08-03T14:30:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Abreu_IlkaNacifde_D.pdf: 8621519 bytes, checksum: 1e6f64122559a086ded7330cb99de555 (MD5) Previous issue date: 2002 === Resumo: O crescente interesse no estudo de espécies do gênero Hypericum, em decorrência das publicações sobre os efeitos farmacológicos de extratos de H. perforatum, fez com que surgissem nos últimos anos estudos fitoquímicos e farmacológicos com H. brasiliense, demonstrando que a espécie apresenta grande potencial farmacológico. Neste trabalho, a partir de análises fitoquímicas em raízes de H. brasiliense foram isoladas as substâncias acilfloroglucinol, xantona e ácido betulínico, que tiveram suas estruturas elucidadas através de técnicas de RMN de H1 e C13, EM, UV e IV. Tais substâncias, juntamente com quercetina e rutina, também identificadas nos extratos, foram quantificadas em diferentes partes das plantas (apical, mediana superior, mediana inferior e raiz), quando em diferentes estádios de desenvolvimento (vegetativo, florescimento e frutificação) e em plantas com 2 e 3 meses, após serem submetidas a estresse hídrico (hipoxia e déficit hídrico) e térmico (10, 30, 17 e 36°C sob baixa e alta intensidade luminosa). A variabilidade genética do material utilizado nos experimentos foi avaliada através da técnica de isozimas, utilizando dez sistemas enzimáticos. Também foi estudado o potencial morfogenético in vitro de gemas apicais provenientes de plantas em estádio de desenvolvimento juvenil e adulto. Completando o trabalho foi realizada a análise da composição do óleo essencial através de CG-EM, por co-injeção com hidrocarbonetos de cadeia longa e comparação do índice de Kovats, dos compostos identificados, com os da literatura. A maior produção de compostos fenólicos ocorreu quando as plantas encontravam-se em florescimento, mas o maior acúmulo de ácido betulínico ocorreu quando as plantas encontravam-se em frutificação. Verificou-se produção de metabólitos secundários em resposta às condições de estresse, havendo correlação inversa entre crescimento e a produção dos compostos analisados. Em condição de déficit hídrico houveram as maiores produções de compostos fenólicos totais e ácido betulínico, sendo que em temperatura noturna de 10°C e 36°C constante houve maior produção de compostos fenólicos totais. A produção de acilfloroglucinol intensificou-se sob déficit hídrico, mas a de xantona foi maior sob hipoxia. Também foi constatada produção de antocianinas em condições de elevada peroxidação lipídica. As análises isozimáticas revelaram que as enzimas eram monomórficas, com apenas 0,09% de variação de alelos, demonstrando que apesar da espécie não ser domesticada, praticamente não há variabilidade genética entre os indivíduos da população em estudo. As gemas, apicais provenientes de plantas juvenis proporcionaram desenvolvimento in vitro com dominância apical, sendo que as provenientes de plantas adultas, proporcionaram florescimento in vitro. Do óleo essencial, 20 compostos foram identificados (94,17% da composição total do óleo), sendo os principais representantes: ß-cariofileno, aromadendreno, a-humuleno, ledeno, ?-cadineno, ledol, óxido de cariofileno, epóxido de humuleno II, cubenol e a-muurolol === Abstract: The increasing interest in studying representatives of the genus Hypericum, mainly because the recent publications on the pharmacological effects of extracts of H. perforatum, has motivated Brazilian scientists to investigate the species H. brasiliense, demonstrating its phytochemical and pharmacological potential. In the present work, the substances acylfloroglucinol, xanthone and betulinic acid were isolated from rots of H. brasiliense and their structure identified by NMR-H1 and C13, mass spectrometry, UV and infrared spectra. These substances, together quercetin and rutin also identified in the extracts, were quantified in different parts of H. brasiliense plants (in the shoot - apical, middle and bottom of the canopy - and roots) , in different developmental stage (vegetative, flowering, frutification) and in plants (2 and 3 months old) subjected to water stress (hipoxy and deficit) and different temperature regimes (10, 30, 17 and 36°C under high and low light intensity). The genetic variability was also studied in the plant material used in the above experiments, using eleven isozyme systems. In addition, the in vitro morphogenetics potential of apical meristems in two developmental stages, named here juvenile and adult stages. Other phytochemical characterization was carried out with the essential oil fraction extracted from the whole plant which was analysed and identified by gas chromatography-mass spectrometry and co-injection with long chain hydrocarbons, and the data obtained compared with the Kovats index for substances already described in the literature. From the experiments of isolation and identification of substances with pharmacological potential, the phenolic substances (acylfloroglucinol, quercetina, rutin and xanthone) accumulated during the flowering. Betulinic acid was found in higher amounts at the fructification. It was observed increase of secondary metabolites in response to drought and a negative relationship between plant growth and the content of these compounds. Phenolic compounds and betulinic acid accumulated more under water stress. In addition, constant night temperatures (10°C and 36°C) induced the largest accumulation of phenolic compounds. There was an increase of acylfloroglucinol with water stress and xanthones increased under hipoxy. The stress was characterized by the increase in anthocyanins and membrane lipid peroxidation. Regarding the genetic variability, isozyme analyses showed that the enzymes used in the study were monomorphy showing only 0,09% allelic variation. This results means that despite of H. brasiliense is not domesticated genetic variability is almost absent in the population used in the present study. The apical meristem from juvenile plants proportionated plants displaying apical dominance while those from adults resulted in plants flowering in vitro. Twenty substances were isolated and identified in the analysis of the essential oil from of H. brasiliense amounting for 94.17% of the total fraction. The main substances were ß-caryophyllene, aromadendrene, a-humulene, ledene, ?-cadinene, ledol, caryophyllene oxide, humulen epoxide II, cubenol e a-muurolol === Doutorado === Doutor em Biologia Vegetal