Hemoglobina gigante de Glossoscolex paulistus (Dligochaeta, Glossoscolecidae) : efeito de cations divalentes e agentes desnaturantes

• Main Author: Marques, Mariza Boscacci
• Other Authors: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: [s.n.] 1992
• Subjects: Hemoglobinas; Bioquímica
• Online Access: MARQUES, Mariza Boscacci. Hemoglobina gigante de Glossoscolex paulistus (Dligochaeta, Glossoscolecidae): efeito de cations divalentes e agentes desnaturantes. 1992. 95f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/314587>. Acesso em: 13 jul. 2018.; http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/314587

Orientador : Nilce Correa Meirelles === Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia === Made available in DSpace on 2018-07-14T02:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_MarizaBoscacci_M.pdf: 2579138 bytes, checksum: c066ef8122b3a68af55b3a456800c50c (MD5) Previous issue date: 1992 === Resumo: A hemoglobina gigante, extracelular de Glossoscolex paul istus apresenta uma massa molecular de 3 x 10 Da que se precipitação por (NH4 )250 4 , optando-se pelo primeiro para a execução dos experimentos. A apoproteína foi obtida e reconstituída na presença de hemina, observando-se estequiometria nesta ligação. Também estudamos o efeito dos íons di valentes Ca ++, Mg++ e Mri ++ sobre a afinidade da proteína pelo oxigênio tendo-se observado aumento de P50- pressão parcial de O2 para saturar 50 % dos sítios de ligação, dependente da concentração dos cátions e mudança na cooperatividade. Em presença de agentes desnaturantes (temperatura, álcalis e uréia) foram obtidos parâmetros cinéticos como K e t . d ½ Os experimentos de transição ácido-alcalina demonstraram a multiplicidade de populações da proteína na forma férrica === Abstract: The giant extracell ular hemoglobin of Glossoscolex paulistus has a molecular weight of 3 x 106 Da. Visualized by electron microscopy, the Glossoscolex paulistus hemoglobin presents two hexagonal superimposed disks In the present study, we compared two different methods of purification for this protein: ultracentrifugation and ammonium sulfate precipitation. Using the purified protein obtained by ultracentrifugation, functional and physico-chemical properties were studied. The apoprotein was obtained and reconsti tuted in the presence of hemin and a stoichiometric relation was observed for this reaction. We also studied the effects of divalent ions such as Ca++, Mg++ e Mn++ on the protein-oxygen affinity. An increase in P50 and also changes in cooperativity were observed in dependance of the cations concentration. Kinetic parameters as Kd and t 1/2 were obtained in the presence 01 denaturing agents (temperature, a1cali and urea). The experiments of the acid-a1cali transition showed the multiplicity of the protein-population in its ferric formo === Mestrado === Bioquimica === Mestre em Ciências Biológicas