Purificação e sequencia parcial de aminoacidos da adesina 2134P isolada de Escherichia coli enterotoxigenica (ETEC)

• Main Author: Amorim, Claudio Roberto Nobrega
• Other Authors: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: [s.n.] 1996
• Subjects: Escherichia coli; Antígenos; Sequencia de aminoacidos; Bacterias patogênicas; Bioquímica
• Online Access: AMORIM, Claudio Roberto Nobrega. Purificação e sequencia parcial de aminoacidos da adesina 2134P isolada de Escherichia coli enterotoxigenica (ETEC). 1996. 76f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/314540>. Acesso em: 21 jul. 2018.; http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/314540

Orientador: Maria Sumiko Arita Matsuura === Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia === Made available in DSpace on 2018-07-21T13:08:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amorim_ClaudioRobertoNobrega_M.pdf: 3407710 bytes, checksum: 3bcfb4652357a5fa35b5a91e15d4f0d2 (MD5) Previous issue date: 1996 === Resumo: Colibacilose ocorre em leitões recém-nascidos e pós-desmame. A doença é caracterizada por diarréia aguda, desidratação progressiva e morte, o que leva a uma considerável perda econômica. Para a Escherichia coli causar doença, ela necessita de pelo menos dois fatores de virulência: a) produção de enterotoxinas e, b) produção de adesinas. A proposta deste estudo foi a detecção, isolamento, purificação e caracterização de uma nova adesina, conhecida como 2134P, em amostras de E. coli enterotoxigênica (ETEC) isoladas de leitões com diarréia no Brasil. Esta adesina foi detectada numa freqüência alta (30,0%) em amostras de ETEC, que não expressavam as adesinas K88, K99, 987P, F41 e F42. Isto sugere um papel importante da adesina 2134P na enteropatogenia da colibacilose suma. A adesina 2134P isolada foi purificada por cromatografia em Sepharose CL 4B e analisada por SDS-P AGE corado com Coomassie Blue, apresentando uma única banda de 17 KDa., reconhecida pelo antissoro 2134P por "Westem blot". A técnica de "gold immunolabeling" revelou que a adesina 2134P é uma estrutura do tipo fimbria localizada na superfície da bactéria. A seqüência dos quinze primeiros aminoácidos da porção N-terminal da adesina 2134P foi obtida, a qual apresentou uma homologia de 10 aminoácidos (66%) com a porção N-terminal da fimbria FI07 (FI8ab) === Abstract: Enterotoxigenic colibacillosis occurs in newbom piglets and weaned pigs. It is characterizated by acute diarrhea, progressive dehydratation and death in a few days which lead to considerable economic loss. Disease is caused by two mainly virulence factors of Escherichia cali: a) production of enterotoxins and, b) production of adhesins. The purpose of this study was the detection, isolation purification and characterization of a novel adhesin, referred as 2134P, in Escherichia calí enterotoxigenic (ETEC) strains isolated from piglets with diarrhea in Brazil. This adhesin was detected in a high frequency (30.0%) in these ETEC strains, which didn't present the adhesins K88, K99, 987P, F41 and F42. Its suggests the important role of adehsin 2134P in porcine enter pathogenesis. The adhesin 2134P was purified on Sepharose CL 4B column chromatography, and was analyzed by SDS-PAGE stained with Coomassie Blue, and presented only one band of approximately 17 KDa identified in Westem blot using specific anti-2134P serum. Gold immunolabeling technique revealed that adhesin 2134P is a fimbrial structure on bacterial surface. It was obtained the first fifteen amino acids sequencing-signal of the N-termini portion of the adhesin 2134P, with a homology of 10 amino acids (66%) with the FI07 (FI8ab) fimbriae === Mestrado === Bioquimica === Mestre em Ciências Biológicas