Evidencia farmacologica e imunohistoquimica de um sistema funcional de oxido nitrico sintase em eosinofilos peritoneais de rato

• Main Author: Zanardo, Renata Cristina Onishi
• Other Authors: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: [s.n.] 1997
• Subjects: Quimiotaxia; Eosinófilos; Óxido nítrico
• Online Access: ZANARDO, Renata Cristina Onishi. Evidencia farmacologica e imunohistoquimica de um sistema funcional de oxido nitrico sintase em eosinofilos peritoneais de rato. 1997. 47f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, [SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/308931>. Acesso em: 23 jul. 2018.; http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/308931

Orientador: Edson Antunes === Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas === Made available in DSpace on 2018-07-23T06:56:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zanardo_RenataCristinaOnishi_M.pdf: 1046055 bytes, checksum: ded086ce156cc17b6aa9966b8a0c660f (MD5) Previous issue date: 1997 === Resumo: Nossos resultados demonstram que, utilizando anticorpo monoclonal de camundongo através de imunohistoquímica, eosinófilos peritoneais de rato expressam a NOS II (30.2 +/- 11.6%) e III (24.7 +/- 7.41%). A migração de eosinófilos in vitro foi avaliada usando-se uma microcâmara de quimiotaxia de 48 poços, e os agentes quimiotáxicos empregados foram N-formil-metionil leucil-fenilalanina (fMLP, 5 x '10 POT. -8 M') e leucotrieno 'B IND. 4' ('LTB IND. 4', '10 POT. -8 M'). O L-NAME (mas não o D-NAME) inibiu significativamente a migração de eosinófilos induzida pelo fMLP (54% de redução para a concentração de 1.0 mM; P<0.05) e 'LTB IND. 4' (61 % de redução para a concentração de 1.0 mM; P<0.05). Os inibidores da NOS II, AMT e TRIM, também atenuaram marcadamente (P<0.05) a migração induzida pelo fMLP (52% e 38% de redução para a concentração de 1.0 mM, respectivamente) e 'LTB IND. 4' (52% e 51 % de redução para a concentração de 1.0 mM, respectivamente). O ODQ (inibidor da guanilato ciclase solúvel), nas concentrações de 0.01 e 0.1 mM, também inibiu significativamente a migração de eosinófilos induzida pelo fMLP. A inibição da migração de eosinófilos pelo L-NAME foi revertida pelo nitroprussiato de sódio (0.1 mM) ou pelo dibutiril GMP cíclico (1 mM). Concluímos que os eosinófilos peritoneais de rato expressam NO sintase(s), e que este mediador desenvolve um papel essencial na locomoção destas células, agindo através de um mecanismo de transdução de GMP cíclico === Abstract: Our results demonstrate that rat peritoneal eosinophil strongly expresses both type II (30.2 +/-11.6%) and type III (24.7 +/- 7.41%), as detected by immunohistochemistry using affinity purified mouse monoclonal antibodies. Eosinophil migration in vitro was evaluated using a 48-well microchemotaxis chamber and the chemotactic agents employed were N-formyl-methionyl-leucylphenylalanine (fMLP, 5 x '10 POT. ¿8' M) and leukotriene 'B IND. 4' ('LTB IND. 4', '10 POT. ¿8' M). L-NAME (but not D-NAME) significantly il")hibited the eosinophil migration induced by both fMLP (54% reduction for 1.0 mM; P<0.05) and 'LTB IND. 4' (61 % reduction for 1.0 mM; P<0.05). The type II NOS inhibitors AMT and TRIM also markedly (P<0.05) attenuated fMLP- (52% and 38% reduction for 1.0 mM, respectively) and 'LTB IND. 4' (52% and 51 % reduction for 1.0 mM, respectively). The inhibition of eosinophil migration by L-NAME was mimicked by the soluble guanylate cyclase inhibitor, ODQ (0.01 and 0.1 mM) and reversed by either sodium nitroprusside (0.1 mM) or dibutyryl cyclic GMP (1 mM). In conclusion, the eosinophil does express NO synthase(s) and this mediator plays an essential role for eosinophillocomotion, , by acting through a cyclic-GMP transduction mechanism === Mestrado === Mestre em Farmacologia