Avaliação dos genes bdnf e ntrk2 em modelo animal Danio rerio (Zebrafish) induzido à crise epiléptica por pentilenotetrazol

• Main Author: Reis-Pinto, Fernanda Christina, 1988-
• Other Authors: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: [s.n.] 2013
• Subjects: Epilepsia; Zebrafish; Fator neurotrófico derivado do cérebro; Pentilenotetrazol; Reação em cadeia da polimerase em tempo real; Epilepsy; Brain-derived neurotrophic factor; Pentylenetetrazole; Real-time polymerase chain reaction
• Online Access: REIS-PINTO, Fernanda Christina. Avaliação dos genes bdnf e ntrk2 em modelo animal Danio rerio (Zebrafish) induzido à crise epiléptica por pentilenotetrazol. 2013. 100 p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/308724>. Acesso em: 23 ago. 2018.; http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/308724

Orientador: Cláudia Vianna Maurer-Morelli === Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas === Made available in DSpace on 2018-08-23T06:03:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reis-Pinto_FernandaChristina_M.pdf: 1859636 bytes, checksum: b8c3841af89fe165c03148ebcc2437ce (MD5) Previous issue date: 2013 === Resumo: O uso de modelos animais tem trazido grandes benefícios para o conhecimento dos processos biológicos normais, bem como para uma maior compreensão das doenças humanas, inclusive as epilepsias. Embora os modelos de roedores sejam os mais usados para explorar os mecanismos que permeiam a epileptogênese, recentemente, um novo modelo animal foi proposto para o estudo das epilepsias, o Daniorerio. Popularmente conhecido como zebrafish, este pequeno peixe possui muitas vantagens para a experimentação científica, principalmente no que se refere à manipulação genética.O Fator Neurotrófico Derivado do Cérebro (BDNF, do inglês, BrainDerivedNeurotrophicFactor) é a neurotrofina de maior abundância no sistema nervoso central e que está relacionada à plasticidade neuronal. Sabe-se que os níveis de transcritos e protéicos desta neurotrofina estão alterados nas epilepsias, tanto em humanos quanto em modelos animais; porém, o seu papel nesta condição ainda é controverso. Os principais objetivos deste estudo foram (i) investigar o perfil temporal de transcritos dos genes bdnfe seus receptores ntrk2a e ntrk2b após crise epiléptica aguda e (ii) após crises epilépticas repetitivas por meio da técnica da PCR quantitativa (qPCR) usando-se o sistema TaqManTM (AppliedBiosystems, Foster City). As crises epilépticas foram induzidas quimicamente por Pentilenotetrazol (PTZ) em animais adultos e seus encéfalos coletados nos tempos: (i) 0,05h, 12h, 24h, 48h, 72h pós-crise aguda e (ii) uma semana após indução de crise diária por cinco dias consecutivos. Os resultados mostraram que as crises epilépticas modificaram o perfil de expressão das neurotrofinas e apontou para um aumento dos níveis de RNAm do gene bdnf no tempo 0,05h (p= 0,01) que não é descrito em outros modelos. É importante salientar que esses resultados mostram que, no encéfalo do zebrafish, as neurotrofinas estão relacionadas com uma atividade neuronal anormal como em outros modelos animais e em humanos. Este é o primeiro estudo a investigar os níveis de transcritos do gene bdnf e seus receptores no encéfalo do zebrafish, contribuindo para a caracterização deste animal como modelo para estudos das epilepsias === Abstract: Animal models have been contributing to a better understanding of human diseases, including epilepsies. Although rodent models are common organisms used to investigate the mechanisms underlying epileptogenesis, recently, Daniorerio has gained attention as a promising model for epilepsy studies. Popular named as zebrafish, this little fish has many advantages for scientific investigation, especially those related to genetic manipulations. BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) is the main neurotropic factor in the central nervous system and it is related to neuronal plasticity. It has been reported that both BDNF transcript and protein levels are increased after seizures in patients and experimental models; however, the temporal transcript profile of the BDNF in the zebrafish brain is unknown. The main aim of this study was to investigate the transcripts profile of bdnf, and ntrk2antrk2b genes by quantitative PCR (qPCR) using TaqManTM system (Applied Biosystems, Foster City), (i) after a single seizure and (ii) repetitive seizures. Seizures were chemically induced by Pentylenetetrazole (PTZ) in adult animals and their brains collected at (i) 0,05h, 12h, 24h, 48h, and 72h after acute seizure and (ii) one week after single seizure/day by five consecutive days. Our results showed that in the zebrafish brain, changes in neurotrophins transcript levels were related to an abnormal neuronal activity as seems in other experimental models and patients and presented an increase of bdnf mRNA levels at 0,05h (p=0.01) described for the first time. This is the first study exploring transcript profile of neurotrophins in zebrafish brain and contributes to characterize it as a model for epilepsy studies === Mestrado === Ciencias Biomedicas === Mestra em Ciências Médicas