Influencia da periodontite cronica severa frente ao controle metabolico bem como do tratamento periodontal na resposta imunologica de individuos diabeticos tipo 2
Orientadores: Getulio da Rocha Nogueira Filho, Maria Cristina Foss de Freitas === Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba === Made available in DSpace on 2018-08-14T01:50:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tunes_RobertaSantos_D.pdf: 3904894 bytes, ch...
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Monócitos Diabetes Mellitus Citocinas Periodontite Teste imunoenzimatico Teste imunoenzimatico Monocytes Diabetes Mellitus Cytokines Inflammation Real-time PCR ELISA Tunes, Roberta Santos Influencia da periodontite cronica severa frente ao controle metabolico bem como do tratamento periodontal na resposta imunologica de individuos diabeticos tipo 2 |
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Orientadores: Getulio da Rocha Nogueira Filho, Maria Cristina Foss de Freitas === Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba === Made available in DSpace on 2018-08-14T01:50:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2009 === Resumo: Este estudo objetiva verificar a influência sistêmica da periodontite crônica severa frente ao controle metabólico bem como do tratamento periodontal na resposta imunológica de indivíduos diabéticos tipo 2 através da análise da expressão gênica e protéica de citocinas por células mononucleares aderentes de sangue periférico. Foram selecionados 20 pacientes divididos em: grupo teste - 10 diabéticos tipo 2 com periodontite crônica severa e controle metabólico inadequado; grupo controle - 10 diabéticos tipo 2 sem periodontite e controle metabólico inadequado. Primeiramente, os pacientes foram hospitalizados por 8 dias para a obtenção de um controle metabólico adequado, permanecendo inalterada a condição periodontal nesta fase. Posteriormente, o grupo teste foi submetido à terapia mecânica em estágio único associada à antibioticoterapia sistêmica com amoxicilina e metronidazol. Amostras sanguíneas foram obtidas no primeiro e último dias de hospitalização, e 4 a 6 semanas após o tratamento periodontal para a análise imunológica. Para avaliação dos parâmetros laboratoriais relacionados ao controle metabólico, como HbA1c, foram obtidas amostras sanguíneas antes e após a hospitalização, e 3 a 6 semanas após o tratamento periodontal. Culturas de um total de 2,5x106 células/mL mononucleares aderentes, foram realizadas por 24h na presença e ausência de LPS (5µg/mL). As citocinas TNF- a, IL-1 ß, IL-8 e IL-6 foram detectadas nos sobrenadantes das culturas através do ELISA, enquanto que a sua expressão gênica foi verificada por PCR em tempo real. Enquanto o controle metabólico diminuiu a secreção de TNF- a (p=0,02), IL-1ß(p=0,03), IL-8 (p=0,04) e IL-6 (p=0,02) nos sobrenadantes das células estimuladas do grupo controle, os pacientes do grupo teste apresentaram níveis maiores destas citocinas após o controle metabólico quando comparados ao grupo controle (p<0,01 ou p=0,01). O controle metabólico bem como a infecção periodontal severa, apesar de não terem influenciado a expressão gênica das citocinas próinflamatórias pelas células estimuladas de ambos os grupos, aumentou a expressão gênica em 2 vezes da IL-8 (p=0,04) pelas células basais do grupo teste, evidenciando-se uma hipoexpressão, respectivamente, de 4, 3 e 11 vezes, da IL-1 ß, IL-8 e IL-6 (p<0,01 ou p=0,01) por estas células no grupo teste em relação ao grupo controle, antes do controle metabólico. Enquanto o tratamento periodontal promoveu uma diminuição da secreção de TNF-?(p=0,04) pelas células estimuladas do grupo teste, o mesmo não influenciou a expressão gênica das citocinas nestas condições. O controle metabólico associado ao tratamento periodontal promoveu um aumento da expressão gênica em 6 e 5 vezes, respectivamente da IL-1 a e IL-6 (p<0,01), pelas células basais do grupo teste. Enquanto, o controle metabólico promoveu reduções na HbA1c de 1% no grupo controle (p=0,04) e 1,1% no grupo teste (p=0,03), o tratamento periodontal promoveu uma redução adicional de 1,6% na HbA1c do grupo teste. Assim, demonstrou-se o papel modulador da periodontite crônica severa na resposta imunológica dos pacientes diabéticos tipo 2, mantendo a capacidade reativa próinflamatória das células mononucleares
frente ao controle metabólico, e que o tratamento desta infecção local pode exercer efeitos sistêmicos, diminuindo o potencial próinflamatório das células mononucleares circulantes, contribuindo para a melhor sensibilidade insulínica e facilitando o controle metabólico destes indivíduos === Abstract: The purpose of this study was to evaluate the systemic influence of chronic severe periodontitis in relation to metabolic control and of periodontal therapy in the immune response of diabetic type 2 patients through the evaluation of cytokine protein and gene expression in human adherent peripheral blood mononuclear cells. Twenty patients were studied, distributed in 2 groups: test group - 10 type 2 diabetic patients with severe chronic periodontitis and inadequate metabolic control; control group - 10 type 2 diabetic patients without periodontitis and inadequate metabolic control. First, all participants were hospitalized for 8 to 10 days to obtain adequate metabolic control, without any periodontal condition alterations. Afterwards, the test group received one-stage non-surgical eriodontal therapy associated with Amoxicilin and Metronidazole. Blood samples were obtained on he first and last day of hospitalization, and 4 to 6 weeks after periodontal therapy for immunological analyses. For metabolic parameters analyses, like HbA1c, blood samples were obtained before and after hospitalization, and 3 to 6 weeks after periodontal therapy. Mononuclear cells were isolated by gradient density using Ficoll-Hypaque?. A
total of 2.5 X 106 adherent cells/mL were cultivated during 24hs in the presence or absence of LPS. The cytokines TNF-a, IL-1ß, IL-8, IL-6 were quantified in cell culture supernatants using ELISA, while their gene expression was verified by Real Time PCR. It was demonstrated that metabolic control promoted a reduction of TNF- a (p=0,02), IL-1?
(p=0,03), IL-8 (p=0,04) and IL-6 (p=0,02) levels in control group supernatants stimulated cells, while the test group showed increased levels of that cytokines compared to the control group after metabolic control (p<0,01 or p=0,01). The metabolic control as the presence of chronic severe periodontal infection, although did not affect the gene expression of that cytokines by stimulated cells from both groups, increased IL-8 gene
expression 2 times (p=0,04) by test group unstimulated cells while it was verified a lower gene expression respectively of IL-1 ß, IL-8 and IL-6 (p<0,01 or p=0,01) by 4, 3, and 11 times related to the control group, before metabolic control. Moreover, periodontal therapy promoted a reduction of TNF- a (p=0,04) levels in test group supernatants stimulated cells,
although did not affect the gene expression of the cytokines studied by these cells. There was observed combined effect of metabolic control and periodontal therapy on IL-1 ß and IL-6 (p<0,01) gene expression, that were increased by 6 and 5 times, respectively, by test group unstimulated cells. While metabolic control promoted reductions of 1% and 1,1% in
HbA1c levels of control and test group respectively, periodontal therapy promoted an additional reduction of 1,6% in HbA1c levels of test group. Therefore, it was suggested that chronic severe periodontal infection can modulate the immunological response of type 2 diabetic patients, through the maintenance of the inflammatory reactive capacity of mononuclear cells even if in the presence of metabolic control, and that the local infection
treatment can promote systemic effects, through decreasing the pro-inflammatory potential of mononuclear circulating cells, helping to restore insulin sensitivity, resulting in an improved glycemic control in those individuals === Doutorado === Periodontia === Doutor em Clínica Odontológica |
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ndltd-IBICT-oai-repositorio.unicamp.br-REPOSIP-2891062019-01-21T21:04:43Z Influencia da periodontite cronica severa frente ao controle metabolico bem como do tratamento periodontal na resposta imunologica de individuos diabeticos tipo 2 Influence of chronic severe periodontitis in the face of metabolic control, and of periodontal therapyin the immune response of diabetic type 2 individuals Tunes, Roberta Santos UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS Freitas, Maria Cristina Foss de Nogueira Filho, Getulio da Rocha Filho, Getulio da Rocha Nogueira Fischer, Ricardo Guimarães Souza, Sergio Luis Scombatti de Pereira, Francisco de Assis Sallum, Antonio Wilson Monócitos Diabetes Mellitus Citocinas Periodontite Teste imunoenzimatico Teste imunoenzimatico Monocytes Diabetes Mellitus Cytokines Inflammation Real-time PCR ELISA Orientadores: Getulio da Rocha Nogueira Filho, Maria Cristina Foss de Freitas Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Made available in DSpace on 2018-08-14T01:50:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tunes_RobertaSantos_D.pdf: 3904894 bytes, checksum: 5bfa07e25946e02ccbf23c44e8160e08 (MD5) Previous issue date: 2009 Resumo: Este estudo objetiva verificar a influência sistêmica da periodontite crônica severa frente ao controle metabólico bem como do tratamento periodontal na resposta imunológica de indivíduos diabéticos tipo 2 através da análise da expressão gênica e protéica de citocinas por células mononucleares aderentes de sangue periférico. Foram selecionados 20 pacientes divididos em: grupo teste - 10 diabéticos tipo 2 com periodontite crônica severa e controle metabólico inadequado; grupo controle - 10 diabéticos tipo 2 sem periodontite e controle metabólico inadequado. Primeiramente, os pacientes foram hospitalizados por 8 dias para a obtenção de um controle metabólico adequado, permanecendo inalterada a condição periodontal nesta fase. Posteriormente, o grupo teste foi submetido à terapia mecânica em estágio único associada à antibioticoterapia sistêmica com amoxicilina e metronidazol. Amostras sanguíneas foram obtidas no primeiro e último dias de hospitalização, e 4 a 6 semanas após o tratamento periodontal para a análise imunológica. Para avaliação dos parâmetros laboratoriais relacionados ao controle metabólico, como HbA1c, foram obtidas amostras sanguíneas antes e após a hospitalização, e 3 a 6 semanas após o tratamento periodontal. Culturas de um total de 2,5x106 células/mL mononucleares aderentes, foram realizadas por 24h na presença e ausência de LPS (5µg/mL). As citocinas TNF- a, IL-1 ß, IL-8 e IL-6 foram detectadas nos sobrenadantes das culturas através do ELISA, enquanto que a sua expressão gênica foi verificada por PCR em tempo real. Enquanto o controle metabólico diminuiu a secreção de TNF- a (p=0,02), IL-1ß(p=0,03), IL-8 (p=0,04) e IL-6 (p=0,02) nos sobrenadantes das células estimuladas do grupo controle, os pacientes do grupo teste apresentaram níveis maiores destas citocinas após o controle metabólico quando comparados ao grupo controle (p<0,01 ou p=0,01). O controle metabólico bem como a infecção periodontal severa, apesar de não terem influenciado a expressão gênica das citocinas próinflamatórias pelas células estimuladas de ambos os grupos, aumentou a expressão gênica em 2 vezes da IL-8 (p=0,04) pelas células basais do grupo teste, evidenciando-se uma hipoexpressão, respectivamente, de 4, 3 e 11 vezes, da IL-1 ß, IL-8 e IL-6 (p<0,01 ou p=0,01) por estas células no grupo teste em relação ao grupo controle, antes do controle metabólico. Enquanto o tratamento periodontal promoveu uma diminuição da secreção de TNF-?(p=0,04) pelas células estimuladas do grupo teste, o mesmo não influenciou a expressão gênica das citocinas nestas condições. O controle metabólico associado ao tratamento periodontal promoveu um aumento da expressão gênica em 6 e 5 vezes, respectivamente da IL-1 a e IL-6 (p<0,01), pelas células basais do grupo teste. Enquanto, o controle metabólico promoveu reduções na HbA1c de 1% no grupo controle (p=0,04) e 1,1% no grupo teste (p=0,03), o tratamento periodontal promoveu uma redução adicional de 1,6% na HbA1c do grupo teste. Assim, demonstrou-se o papel modulador da periodontite crônica severa na resposta imunológica dos pacientes diabéticos tipo 2, mantendo a capacidade reativa próinflamatória das células mononucleares frente ao controle metabólico, e que o tratamento desta infecção local pode exercer efeitos sistêmicos, diminuindo o potencial próinflamatório das células mononucleares circulantes, contribuindo para a melhor sensibilidade insulínica e facilitando o controle metabólico destes indivíduos Abstract: The purpose of this study was to evaluate the systemic influence of chronic severe periodontitis in relation to metabolic control and of periodontal therapy in the immune response of diabetic type 2 patients through the evaluation of cytokine protein and gene expression in human adherent peripheral blood mononuclear cells. Twenty patients were studied, distributed in 2 groups: test group - 10 type 2 diabetic patients with severe chronic periodontitis and inadequate metabolic control; control group - 10 type 2 diabetic patients without periodontitis and inadequate metabolic control. First, all participants were hospitalized for 8 to 10 days to obtain adequate metabolic control, without any periodontal condition alterations. Afterwards, the test group received one-stage non-surgical eriodontal therapy associated with Amoxicilin and Metronidazole. Blood samples were obtained on he first and last day of hospitalization, and 4 to 6 weeks after periodontal therapy for immunological analyses. For metabolic parameters analyses, like HbA1c, blood samples were obtained before and after hospitalization, and 3 to 6 weeks after periodontal therapy. Mononuclear cells were isolated by gradient density using Ficoll-Hypaque?. A total of 2.5 X 106 adherent cells/mL were cultivated during 24hs in the presence or absence of LPS. The cytokines TNF-a, IL-1ß, IL-8, IL-6 were quantified in cell culture supernatants using ELISA, while their gene expression was verified by Real Time PCR. It was demonstrated that metabolic control promoted a reduction of TNF- a (p=0,02), IL-1? (p=0,03), IL-8 (p=0,04) and IL-6 (p=0,02) levels in control group supernatants stimulated cells, while the test group showed increased levels of that cytokines compared to the control group after metabolic control (p<0,01 or p=0,01). The metabolic control as the presence of chronic severe periodontal infection, although did not affect the gene expression of that cytokines by stimulated cells from both groups, increased IL-8 gene expression 2 times (p=0,04) by test group unstimulated cells while it was verified a lower gene expression respectively of IL-1 ß, IL-8 and IL-6 (p<0,01 or p=0,01) by 4, 3, and 11 times related to the control group, before metabolic control. Moreover, periodontal therapy promoted a reduction of TNF- a (p=0,04) levels in test group supernatants stimulated cells, although did not affect the gene expression of the cytokines studied by these cells. There was observed combined effect of metabolic control and periodontal therapy on IL-1 ß and IL-6 (p<0,01) gene expression, that were increased by 6 and 5 times, respectively, by test group unstimulated cells. While metabolic control promoted reductions of 1% and 1,1% in HbA1c levels of control and test group respectively, periodontal therapy promoted an additional reduction of 1,6% in HbA1c levels of test group. Therefore, it was suggested that chronic severe periodontal infection can modulate the immunological response of type 2 diabetic patients, through the maintenance of the inflammatory reactive capacity of mononuclear cells even if in the presence of metabolic control, and that the local infection treatment can promote systemic effects, through decreasing the pro-inflammatory potential of mononuclear circulating cells, helping to restore insulin sensitivity, resulting in an improved glycemic control in those individuals Doutorado Periodontia Doutor em Clínica Odontológica 2009 2018-08-14T01:50:30Z 2018-08-14T01:50:30Z info:eu-repo/semantics/publishedVersion info:eu-repo/semantics/doctoralThesis TUNES, Roberta Santos. 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