Atividade antimicrobiana dos extratos da Rheedia brasiliensis e potencial anticarie do seu composto bioativo

• Main Author: Almeida, Luciana Salles Branco de
• Other Authors: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: [s.n.] 2008
• Subjects: Streptococcus mutans; Cárie dentária; Dental caries
• Online Access: ALMEIDA, Luciana Salles Branco de. Atividade antimicrobiana dos extratos da Rheedia brasiliensis e potencial anticarie do seu composto bioativo. 2008. 55p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/288507>. Acesso em: 10 ago. 2018.; http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/288507

Orientador: Pedro Luiz Rosalen === Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba === Made available in DSpace on 2018-08-10T06:14:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_LucianaSallesBrancode_M.pdf: 997625 bytes, checksum: 22585531caf6213f9ef4a62e5b018a3b (MD5) Previous issue date: 2008 === Resumo: Este estudo avaliou a atividade antimicrobiana de extratos da Rheedia brasiliensis contra Streptococcus mutans e o potencial anticárie do seu composto ativo isolado. Os extratos hexânicos (EH), acetato de etila e etanólico (concentrações entre 6,25-800 µg/ml) do fruto (¿bacupari¿) foram testados contra S. mutans UA159 por meio de determinação das concentrações inibitória mínima (CIM) e bactericida mínima (CBM). Biofilmes de 5 dias de formação foram tratados com os extratos ativos (100 x CIM), por 0, 1, 2, 3 e 4 h, e plaqueados para contagem das UFC/ml (time kill). Os extratos ativos foram submetidos à análise química por métodos espectroscópicos, e o composto ativo isolado (0,625-80 µg/ml) foi testado contra células de S. mutans por meio de CIM/CBM. A influência do composto isolado (12,5-100 µg/ml) sobre a síntese de glucanos foi avaliada através da atividade da enzima glucosiltranferase (GTF) B em superfície de hidroxiapatita. A ação do composto sobre biofilmes (125 e 250 µg/ml) foi testada com os ensaios de queda de pH e inibição de formação de biofilme. O potencial anticárie do composto (250 µg/ml) foi avaliado em ratas Wistar sob alto desafio cariogênico. Os EH (casca e semente) inibiram S. mutans em baixas concentrações (CIM:12,5-25 µg/ml) e reduziram células viáveis dos biofilmes após 4 h de exposição. O composto ativo presente foi identificado como a 7- epiclusianona (7-epi), a qual inibiu o crescimento do S. mutans (CIM:1,25-2,5 µg/ml), a atividade da GTF B em superfície (48% de inibição) e a produção de ácidos do S. mutans em biofilme, porém não reduziu a formação e o acúmulo dos biofilmes. No estudo animal, a 7-epi reduziu a incidência e a severidade de cárie e a microbiota total, mas não diminuiu a porcentagem de S. mutans. A 7-epi diminuiu a virulência do S. mutans e inibiu o desenvolvimento de cárie in vivo, sugerindo ser um agente terapêutico promissor para o controle do biofilme dental cariogênico. Palavras-chave: Rheedia brasiliensis, 7-epiclusianona, Streptococccus mutans, fatores de virulência, cárie animal === Abstract: The present study evaluated the antimicrobial activity of Rheedia brasiliensis extracts against Streptococcus mutans and the anticaries properties of its isolated bioactive compound. Hexane (HE), ethyl-acetate and ethanolic extracts (concentrations ranging from 6.25 to 800 µg/ml) of R. brasiliensis fruits (¿bacupari¿) were tested against S. mutans UA159 by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC). S. mutans 5-days-old biofilms were treated with active extracts (100 x MIC), for 0, 1, 2, 3 e 4 h (time-kill), and plated for colony counting (UFC/ml). Such extracts were submitted to exploratory chemical analyses to isolate and identify the bioactive compound using spectroscopic methods. The compound (0.625-80 µg/ml) was then tested against S. mutans cells using MIC/MBC assays. The influence of the bioactive compound (12.5-100 µg/ml) on glucans synthesis was evaluated by testing the activity of glucosyltranferase (GTF) B on hydroxyapatite surface. The effects of the compound (125 e 250 µg/ml) on biofilms were analyzed using glycolytic pH-drop and inhibition of formation assays. The anticaries activity of such compound (250 µg/ml) was evaluated in Wistar rats submitted to a high cariogenic challenge. HE (peel and seeds) reduced S. mutans cells at low concentrations (MIC:12.5-25 µg/ml) and also biofilm viability after four hours, confirming the presence of the bioactive compound. This compound was identified as 7-epiclusianone (7-epi), which inhibited the S. mutans growth (MIC:1.25-2.5 µg/ml), the activity of GTF B (48% of inhibition) and the acid production, not interfering with the formation and accumulation of biofilms. In the animal study, 7-epi additionally reduced the incidence and severity of caries and also the total microbiota, however no reduction on the percentage of S. mutans was observed. In conclusion, 7-epi may be considered a promising agent to control cariogenic dental biofilm. Keywords: Rheedia brasiliensis, 7-epiclusianone, Streptococccus mutans, virulence factors, animal caries === Mestrado === Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica === Mestre em Odontologia