Síntese, purificação, caracterização e análise da atividade antinociceptiva de peptídeos opióides

• Main Author: Nóbrega, Mariana Magalhães
• Other Authors: Bloch Júnior, Carlos
• Language: Portuguese
• Published: 2013
• Subjects: Testes In Vivo; Peptídios opióides
• Online Access: http://repositorio.unb.br/handle/10482/12881

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, 2013. === Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros ([e-mail]) on 2013-04-18T13:55:46Z No. of bitstreams: 1 2013_MarianaMagalhãesNóbrega_Parcial.pdf: 4669193 bytes, checksum: 470b6e88d4408bfc14b01984e61c33ac (MD5) === Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza([e-mail]) on 2013-04-24T13:51:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_MarianaMagalhãesNóbrega_Parcial.pdf: 4669193 bytes, checksum: 470b6e88d4408bfc14b01984e61c33ac (MD5) === Made available in DSpace on 2013-04-24T13:51:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_MarianaMagalhãesNóbrega_Parcial.pdf: 4669193 bytes, checksum: 470b6e88d4408bfc14b01984e61c33ac (MD5) === A prospecção de peptídeos com atividade biológica é importante do ponto de vista biotecnológico assim como ponto de partida em diversos ramos da pesquisa como no desenvolvimento de novas drogas e na produção de plantas geneticamente modificadas. Este trabalho tem como objetivo a predição e a síntese de peptídeos que tenha atividade antinociceptiva e hipotensora. A predição da estrutura primária dos peptídeos foi realizada com base em trabalhos anteriores do grupo, os quais focam na prospecção e caracterização de peptídeos bioativos, assim como no conhecimento disponível na literatura acerca das propriedades biológicas apresentadas por domínios protéicos específicos. Os peptídeos foram sintetizados por meio de síntese química em fase sólida, utilizando a estratégia Fmoc, seguida da purificação em cromatografia líquida de alta eficiência. O grau de pureza e a confirmação da estrutura primária dos peptídeos sintetizados foram determinados por espectrometria de massa, Maldi e ESI. Os peptídeos foram testados em camundongos , por via intraperitoneal com intuito de avaliar sua possível atividade antinociceptiva, realizaram-se então os testes da placa quente ou Hot Plate e teste de retirada da cauda ou Tail Flick. Os testes in vivo demonstraram que os peptídeos sintéticos PSLEM 11011 e 11012 apresentaram atividade antinociceptiva via receptores opióides com perfil de atividade mais tardio e duradouro em relação a morfina. Eles apresentaram atividade nos dois modelos de testes propostos, podem ter atravessado a barreira hematoencefálica e possuem ação prolongada. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT === To prospect of peptides with biological activity is important from the point of view of biotechnology as a starting point in many fields of research as the development of new drugs and the production of genetically modified plants. This study aims to predict and synthesize peptides that have antinociceptive and hypotensive activities. The prediction of the primary structure of the peptides was based on previous work of the group, which focuses on the prospection and characterization of bioactive peptidesas well as in the knowledge available in the literature about the biological properties of specific protein domains. The peptides were synthesized by solid-phase chemical synthesis using Fmoc strategy followed by purification on high performance liquid chromatography. The purity and confirmation of the primary structure of the synthesized peptides were determined by mass spectrometry, MALDI and ESI.The peptides were injected in mice intraperitoneally in order to assess its possible antinociceptive activity through Hot Plate and Tail Flick assays.The in vivo tests showed that synthetic peptides PSLEM 11011 and 11012 have antinociceptive activity via opioid receptors with delayed response and longer activity compared to morphine. The peptides showed activity in both test models proposed in this work, may have crossed the blood-brain barrier and presenting high bioavailability.