Estudo da associação entre duas regiões do genoma do rato, localizadas nos cromossomos 4 e 7, e a emocionalidade em duas linhagens de ratos selecionadas no teste do campo aberto

• Main Author: Hameister, Thaís Muller
• Other Authors: Universidade Federal de Santa Catarina
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Florianópolis, SC 2012
• Subjects: Neurociências; Rato como animal de laboratorio; Ansiedade; Linhagem; (Genetica); Mapeamento cromossomico
• Online Access: http://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/91391

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-graduação em Neurociências === Made available in DSpace on 2012-10-23T22:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 249957.pdf: 305651 bytes, checksum: 44670f55984b0c3df4c99c7e64d2cf58 (MD5) === As linhagens de ratos Floripa H e Floripa L, selecionadas bidirecionalmente para extremos de locomoção no centro do teste do campo aberto (CA), um comportamento relacionado à emocionalidade, foram propostas como um modelo animal para estudar a genética da ansiedade. As duas influência de dois locus para traços quantitativos (QTLs). Ambos QTLs foram previamente identificados em uma geração F2 resultante do acasalamento de ratos LEW e SHR afetando a ativividade locomotora no centro do CA, o mesmo fenótipo foi utilizado como parâmetro de seleção nas linhagens Foripa. Os dois QTLs, um no cromossomo 4 e outro no 7, respectivamente, foram denominados de open field inner locomotion QTL 1 (Ofil1) e open field inner locomotion QTL 2 (Ofil2). O presente estudo teve como objetivo verificar se os QTLs (Quantitative Trait Locus) Ofil1 e Ofil2, sabidamente associados a comportamentos emocionais em ratos derivados das linhagens isogênicas LEW e SHR, estariam da mesma forma contribuindo para este fenótipo comportamental nas linhagens Floripa, selecionadas a partir de uma resultante de um intercruzamento entre linhagens parentais ainda não investigadas do ponto de vista genotípico. Com este objetivo, foram utilizados quatro marcadores moleculares do tipo microssatelite, dois flanqueando o pico de Ofil1 (D4RAT59 e D4MGH27) e dois flanquando o pico de Ofil2 (D7MGH11 e D7RAT35), que se mostraram polimórficos para o modelo animal em estudo. Para verificar se o genótipo destas duas regiões estaria influenciando o fenótipo selecionado, ratos de cinco gerações foram genotipados para os quatro marcadores utilizados. Mudanças nas freqüências alélicas e genotípicas ao longo do processo de seleção foram avaliadas para verificar se a seleção imposta ao fenótipo foi acompanhada por divergências genotípicas entre as linhagens. Foram observadas alterações nas freqüências genotípicas em todos marcadores moleculares para ambos os QTLs, porém somente os genótipos para os marcadores no locus Ofil1, pareceram estar significativamente correlacionados com a variação no fenótipo selecionado. Este resultado sugere que nesta região do genoma deve existir um ou mais genes contribuindo para a variação interindividual na locomoção na área aversiva do teste do CA. As alterações nas freqüências genotípicas observadas para os marcadores do QTL Ofil2, por aparentemente não apresentarem correlação com o fenótipo, parecem ser resultado de deriva genética aleatória, talvez com pequena contribuição. Portanto, através deste trabalho, corrobora-se a influência do locus Ofil1,em diferentes linhagens de ratos, para um comportamento relacionado à emocionalidade, porém o efeito de Ofil2 não pode ainda ser descartado. The strains of rats named Floripa H and L, bidirectionaly selected to extremes of locomotion in the centre of the test of open field (OF), an emotionality-related behavior, were proposed as an animal model to study the genetics of anxiety. The two strains were developed in order to investigate the influence of two quantitative trait locus (QTLs) Both QTLs were previously identified in a generation F2, resulting from the mating of rats and LEW SHR, affecting the locomotor activity in OF test, the same phenotype was used as a parameter for selection in Floripa strains. The two QTLs, one on chromosome 4 and another at 7, respectively, were called open field inner locomotion QTL 1 (Ofil1) and open field inner locomotion QTL 2 (Ofil2). This study aimed to ascertain whether the QTLs (Quantitative Trait Locus) Ofil1 and Ofil2, known associated with emotional behavior in rats isogenic lines derived from LEW and SHR, would be the same way contributing to this behavioral phenotype among strains Floripa, selected from of a generation of animals resulting from an intercruzamento between parental strains have not yet investigated the point of view genotipic. Two loci for central locomotion in the open field test (OF) were identified in the F2 generation resulting from the intercross of LEW and SHR rats. A locus on chromosome 4 and another on chromossome 7, respectively, were named Ofil1 and Ofil2. The present study aimed to verify whether the QTLs (Quantitative Trait Locus) Ofil1 and Ofil2, known to be associated with emotional behaviors in rats derived from the strains LEW and SHR, would contribute to the same behavioral phenotype in Floripa H and L rats, selected from another population of animals. With this objective, we used four molecular microssatelite markers, two flanking the peak of Ofil1 (D4RAT59 and D4MGH27) and two flanking the peak of Ofil2 (D7MGH11 and D7RAT35), which were polymorphic for the animal population under study. To verify whether the genotype of these two regions would influence the selected phenotype, five generations of rats were genotyped for the four markers used. Changes in genotypic and allelic frequencies throughout the process of selection were evaluated to determine if the selection on the phenotype was accompanied by genotypic differences between the strains. There were changes in genotypic frequencies in all molecular markers for both QTLs, but only the markers on locus Ofil1, seemed to be significantly correlated with the changes in the phenotype. This result suggests that this region of the genome may contain one or more genes contributing to the interindividual variation in locomotion in the aversive area test of the OF. The changes in genotypic frequencies observed for the QTL Ofil2 markers, had apparently no correlation with the phenotype, as it appeared to be the result of random genetic drift, perhaps with little effect of selection. therefore, through this work, we confirm the influence of the locus Ofil1, in different strains of rats, on an emotionality-related behavior, but the effect of Ofil2 is not totally discarded.